培養(yǎng)皿中如何生產(chǎn)眼淚?干細(xì)胞培養(yǎng)基助力科研
干細(xì)胞的維持、增殖和分化通常需要在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)條件下進(jìn)行。Ausbian干細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基,是在含微量胎牛血清的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,通過(guò)添加一種人永生化干細(xì)胞系的條件培養(yǎng)基混合組成,是一款即用型干細(xì)胞培養(yǎng)基,適合各類(lèi)干細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖。
覆蓋眼睛的結(jié)膜上皮包含兩種主要的細(xì)胞類(lèi)型:產(chǎn)生黏液的杯狀細(xì)胞和分泌水的角化細(xì)胞,它們的頂端表面呈現(xiàn)黏液。近日,科研人員描述了長(zhǎng)期擴(kuò)張的類(lèi)器官和代表小鼠和人結(jié)膜的氣液界面。原代和培養(yǎng)人結(jié)膜的單細(xì)胞RNA表達(dá)圖譜顯示,角質(zhì)形成細(xì)胞表達(dá)多種抗菌肽,并識(shí)別結(jié)膜簇細(xì)胞。IL-4/-13暴露增加杯狀細(xì)胞和簇狀細(xì)胞分化,并顯著改變結(jié)膜分泌組。人NGFR+基底細(xì)胞被鑒定為雙能結(jié)膜干細(xì)胞。結(jié)膜培養(yǎng)物可被單純皰疹病毒1型(HSV1)、人類(lèi)腺病毒8型(hAdV8)和SARS-CoV-2感染。添加藥物可以逆轉(zhuǎn)HSV1感染,而缺乏批準(zhǔn)藥物治療的hAdV8感染可以被相關(guān)藥物抑制??蒲腥藛T記錄了HSV1和hAdV8誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄程序。
相關(guān)研究成果發(fā)表在《Cell Stem Cell》上,文章標(biāo)題為:“Human Conjunctiva Organoids to Study Ocular Surface Homeostasis and Disease”。
結(jié)膜位于眼瞼的內(nèi)表面,覆蓋著鞏膜(眼睛的白色部分)。它由含有成纖維細(xì)胞、血管和免疫細(xì)胞的間質(zhì)層組成,被非角化層狀上皮覆蓋兩種分化的上皮細(xì)胞類(lèi)型已被識(shí)別:產(chǎn)生黏液的杯狀細(xì)胞和分泌黏液的角化細(xì)胞在其頂端表面暴露黏液大多數(shù)關(guān)于結(jié)膜的研究都集中在杯狀細(xì)胞上,因?yàn)楸瓲罴?xì)胞與淚腺一起產(chǎn)生覆蓋在眼表面的淚膜的粘蛋白層黏液層對(duì)淚液膜的平衡至關(guān)重要:它使淚液的水層附著在眼表面,防止蒸發(fā)性干眼癥然而,結(jié)膜角質(zhì)形成細(xì)胞除了創(chuàng)造富含黏液的上皮屏障之外的作用以及結(jié)膜干細(xì)胞的身份都沒(méi)有被揭示
對(duì)眼表的研究主要集中在一個(gè)對(duì)視力至關(guān)重要的組織——角膜上然而,結(jié)膜對(duì)視力同樣至關(guān)重要:它的功能障礙最終會(huì)影響角膜的內(nèi)穩(wěn)態(tài),并可能導(dǎo)致失明。結(jié)膜為眼表提供免疫保護(hù)其次,如果物理或病毒損傷了結(jié)膜,淚膜就會(huì)不穩(wěn)定,導(dǎo)致干眼病、不適,最終失明了解結(jié)膜內(nèi)平衡和疾病的一個(gè)主要障礙是缺乏具有代表性的體外模型。事實(shí)上,多年來(lái)建立的結(jié)膜上皮模型存在一些局限性:它們要么是在不明確的條件下培養(yǎng)的短期外植體(即,在飼養(yǎng)細(xì)胞或羊膜上),要么來(lái)自誘導(dǎo)多能干細(xì)胞,這些干細(xì)胞通常不能再現(xiàn)結(jié)膜上皮的細(xì)胞多樣性和成熟度。然而,目前還沒(méi)有一種方案可以讓初級(jí)結(jié)膜組織在規(guī)定的條件下長(zhǎng)期生長(zhǎng)。
能長(zhǎng)期傳代繁殖的成體干細(xì)胞類(lèi)器官先從腸道組織中建立類(lèi)器官是三維結(jié)構(gòu),概括了原始組織的基本結(jié)構(gòu)和功能。類(lèi)器官可以在受控環(huán)境中模擬人類(lèi)生理和疾病的各個(gè)方面在這里,科研人員建立了小鼠和人類(lèi)從初級(jí)結(jié)膜衍生的類(lèi)器官,表明它們概括了結(jié)膜上皮的關(guān)鍵特征,并為研究結(jié)膜(病理)生理學(xué)提供了一個(gè)通用的平臺(tái)。
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