高速逆流色譜儀是一種液相色譜技術(shù),利用液液兩相的逆流分配,在不需要使用固態(tài)固定相的情況下,通過(guò)離心力將固定相保留在一系列連接的腔體中,實(shí)現(xiàn)復(fù)雜化學(xué)物質(zhì)的混合物分離。它以液體溶劑為固定相,利用離心力產(chǎn)生的恒定力將兩相互相混合,保留其中一相,并通過(guò)恒流泵連續(xù)輸入另一相,樣品溶質(zhì)在兩相之間反復(fù)分配,按分配系數(shù)的次序逐漸洗脫出來(lái)。
高速逆流色譜法是建立在單向性流體動(dòng)力平衡體系之上的一種逆流色譜分離方法,它是在研究旋轉(zhuǎn)管的流體動(dòng)力平衡時(shí)偶然發(fā)現(xiàn)的。當(dāng)螺旋管在慢速轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí),螺旋管中的兩相都從一端分布到另一端。用某一相作移動(dòng)相從一端向另一端洗脫時(shí),另一相在螺旋管里的保留值大約50%,但這一保留量會(huì)隨著移動(dòng)相流速的增大而減小,使分離效率降低。但使螺旋管的轉(zhuǎn)速加快時(shí),兩相的分布發(fā)生變化。當(dāng)轉(zhuǎn)速達(dá)到臨界范圍時(shí),兩相就會(huì)沿螺旋管長(zhǎng)度分開(kāi),其中一相全部占據(jù)首端的一段,我們稱(chēng)這一相為首端相,另一段全部占據(jù)尾端的一段,稱(chēng)為尾端相。高速逆流色譜正是利用了兩相的這種單向性分布特征,在高的螺旋管轉(zhuǎn)動(dòng)速下,如果從尾端送入首端相,它將穿過(guò)尾端相而移向首端,同樣,如果從首端相送入尾相,它將穿過(guò)首端相而移向螺旋管的尾端。分離時(shí),在螺旋管內(nèi)首先注入其中的一相(固定相),然后從合適的一端泵入移動(dòng)相,讓它載著樣品在螺旋管中無(wú)限次的分配。儀器轉(zhuǎn)速越快,固定相保留越多,分離效果越好,且大地提高了分離速度,故稱(chēng)高速逆流色譜。
廣泛的應(yīng)用范圍和適應(yīng)性:適用于分離各種極性范圍的樣品,尤其在分離天然化合物方面表現(xiàn)比較好。由于不需要固體載體,消除了氣液色譜中的吸附現(xiàn)象,適用于分離極性物質(zhì)和具有生物活性的物質(zhì)。
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