一、為什么需要進行柱平衡?
· 置換色譜柱內(nèi)儲存的溶劑
· 在流動相和固定相之間建立平衡
· 濕潤固定相以實現(xiàn)分析物的分配
· 產(chǎn)生可靠的結(jié)果。
二、色譜柱沒有平衡好會產(chǎn)生何種影響?
·基線波動
·保留時間變化
·峰形變形
·分離度變差
·響應異常
·產(chǎn)生鬼峰。
三、哪些因素影響色譜柱平衡?
- 固定相性質(zhì):具有龐大基團或空間位阻的固定相(例如苯基柱)可能需要更長的柱平衡時間。
- 表面積:具有較低表面積的固定相有利于更快的柱平衡。
- 孔徑大小:具有較寬孔徑(因此表面積較低)的固定相有利于更快的柱平衡。
-流動相組成:具有較高濃度的緩沖鹽和離子對試劑的流動相需要更長的平衡時間。
-水相的比例:如果流動相中的水相含量較高,柱平衡時間可能較長。
-柱溫:較高的柱溫會加速柱平衡,因為分子運動加快(黏度降低)。
-梯度洗脫中的緩沖鹽濃度:通過在兩個流動相瓶中加入緩沖鹽溶液,以保持洗脫過程中緩沖鹽濃度的穩(wěn)定,有助于加快洗脫過程中的柱平衡速度。
注意:在平衡過程的開始階段應避免使用緩沖鹽:有機相,而是使用比例相符的水:有機溶劑,然后再使用初始流動相平衡。
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