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肽標(biāo)記策略
標(biāo)記肽可以通過修飾分離的肽或在固相合成過程中結(jié)合標(biāo)記來制備。用熒光團標(biāo)記肽的常用策略包括:
肽合成過程中的標(biāo)記-可以耐受解封閉程序的染料可以結(jié)合到肽鏈的氨基末端。
2.N端修飾:N端是指蛋白質(zhì)或多肽鏈起始處的游離胺基（-NH2）?？梢允褂冒贩磻?yīng)性琥珀酰亞胺酯熒光團對其進(jìn)行共翻譯修飾或翻譯后修飾。
3.賴氨酸殘基:賴氨酸殘基的ε-氨基可以用胺反應(yīng)性琥珀酰亞胺酯熒光團修飾。
4.C端修飾:C端是指蛋白質(zhì)或多肽鏈末端的羧基（-COOH）。它可以在翻譯后進(jìn)行修飾，通常是在C端酰胺化之后。
5.如果肽鏈上有半胱氨酸，巰基反應(yīng)蛋白標(biāo)記可以共價標(biāo)記合成肽。
6.非天然氨基酸可以在合成過程中結(jié)合到肽鏈中，然后通過生物正交反應(yīng)（例如基于疊氮化物和炔烴的反應(yīng)以及酮醛反應(yīng)）用染料或其他探針標(biāo)記。
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