小鼠血清（無菌過濾）

血清使用注意事項：

防止發(fā)病免疫血清多用馬、牛血液制備，馬、牛血清對其它動物來說，也具有抗原性，有引起血清病的可能，因此，使用免疫血清要注意防止引起血清病，預防的主要措施是使用提純的制品，不用不合格的產品；另外，不要有急功近利的想法，要按照要求劑量使用，一次用量不可過大。

大鼠小鼠取血操作步驟：

1.剪尾采血  

小鼠每次采血量0.1ml，大鼠每次采血量0.3-0.5ml

左手拇指和食指從背部捉住鼠頸部皮膚，將鼠頭朝下，鼠保定后將其尾巴置于50℃熱水中浸泡數(shù)分鐘，使尾部血管充盈。擦干尾部，再用剪刀或刀片剪去尾尖1-2mm，用試管接流出的血液，同時自尾根部向尾尖按-摩。取血后用棉球壓榨止血并用6%液體火棉膠涂在傷口處止血。

2.去除眼球采血

小鼠采血量0.5-1ml

左手捉住小鼠頸部皮膚，輕壓在實驗臺上，取側臥位，左手食指盡量將小鼠眼周皮膚往頸后壓，使眼球杰出。用眼科彎鑷迅速夾去眼球，將鼠倒立，

用器皿接住流出的血液。采血完畢立即用紗布壓榨止血。大鼠少用。

3.心臟采血

小鼠采血量0.5-0.6ml，大鼠采血量1-1.5ml

鼠仰臥位固定，剪去胸前區(qū)被毛，皮膚消毒后，用左手食指在左側第3-4肋間觸摸到心搏處，右手持帶有4-5號針頭的注射器，選擇心搏zui強處穿刺，當刺中心臟時，血液會主動進入注射器。

4.斷頭采血

小鼠采血0.8-1.2ml，大鼠采血量5-10ml

左手拇指和食指從背部捉住鼠頸部皮膚，將鼠頭朝下，右手用剪刀剪斷鼠頸部約1/2-4/5，讓血液流入試管。

5.眼眶靜脈叢采血

小鼠采血量為0.2-0.4ml，大鼠采血量為0.4-0.8ml

取內徑為1.0-1.5mm的玻璃毛細管，臨用前折斷成1～1.5cm長的毛細管段，浸入1％肝素溶液中，干燥后用。取血時左手捉住鼠兩耳之間的頸背部皮膚以固定頭部，悄悄向下壓榨頸部兩邊，引起頭部靜脈血液回流困難使眼眶靜脈叢充血，右手持毛細管由內眥部刺進結膜，再悄悄向眼底部方向推進，悄悄旋轉毛細管以劃破靜脈叢，讓血液順毛細管流出，接收入事前準備的容器中。采血后紗布輕壓眼部止血。小鼠、大鼠、豚鼠及家兔均可采納此法取血。刺入深度小鼠為2-3mm，可采血0.2-0.3ml；大鼠為4-5mm，可采血0.4-0.8ml。

Tips：

1. 血清的保存：在-15℃以下血清的有效期為5年，4℃可保存數(shù)周，不宜室溫保存，不宜反復凍融。配制成培養(yǎng)基后應在四周內用完，一瓶血清如無法一次用完應無菌分裝成恰當數(shù)量并冷凍保存。

2、血清中的絮狀沉淀物：血清是多種蛋白質的混合物，在凍融過程中會出現(xiàn)絮狀沉淀物，主要原因是由于血清中脂蛋白和纖維蛋白變性所造成。但并不影響血清本身的質量和使用。如需去除可先400g離心取上清液配制成培養(yǎng)基再過濾即可使用。

3、血清的解凍：合理的解凍方式可以更好的保護血清質量并可以在上減少絮狀沉淀物的產生。血清從低溫冰箱中取出后，經(jīng)4℃冰箱、室溫、37℃水浴逐步規(guī)則搖晃均勻融解，直至融解后再使用。

4、血清的熱滅活：將血清嚴格56℃水浴均勻加溫30分鐘可以滅活血清中的補體系統(tǒng)。是不是所有用途的血清都需要熱滅活呢？對大多數(shù)細胞來說是不需要的。激活的補體能參與溶解細胞，刺激光滑肌收縮，細胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細胞和巨噬細胞。因此在免疫學研究，培養(yǎng)ES細胞，昆蟲細胞和平滑肌肉細胞時，建議使用熱滅活血清，在正常情況下加熱處理對血清的促細胞生長效應無明顯促進作用，甚至會因為加熱處理影響血清的質量。

5、血清中的“小黑點”現(xiàn)象：血清在經(jīng)過一段時間的低溫凍存再融解后，在正常情況下會出現(xiàn)絮狀蛋白沉淀。但往往有用戶反應血清中有“小黑點”現(xiàn)象，認為是微生物污染。實驗發(fā)現(xiàn)血清在37℃環(huán)境放置時間過長或經(jīng)過加熱滅活處理，血清中的沉淀物往往會呈增多趨勢，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點”，讓使用者誤以為是血清遭受微生物污染并在分裂增殖。因此如無必要，可以不進行熱滅活處理并保證血清的低溫保存。

小鼠血清（無菌過濾）

實驗證明使用血清時注意以下幾點事項不但可以保證血清質量并能給使用者帶來方便：

◎血清可在-15℃以下低溫保存。

◎血清一瓶血清一次無法用完的應分裝凍存，分次用完。

◎血清按-15℃以下至4℃至室溫至37℃逐步均勻解凍使用。

◎若非必要，無須進行熱滅活。若必須做血清熱滅活的，須嚴格控制在56℃水浴30分鐘均勻加熱滅活。

血清的定義

血清指血漿除去纖維蛋白原后的膠狀液體。每100ml人血清含有蛋白質6-8g，其中主要是白蛋白和球蛋白。血清不會凝固。有免疫，維持酸堿平衡和滲透壓的作用，血清蛋白質亦可儲備供給機體蛋白質不足時的應用。人和動物的血清常用以進行各種血清學試驗，幫助診斷疾病。含抗體的血清可作為預防或治療疾病之用

血清的主要成分

血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作用。它主要由水和各種化學成分組成，這些化學成分包括白蛋白，α1、α2、β、γ-球蛋白，甘油三酯，總，谷丙轉氨酶等。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等，這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。對血清的成分和作用的研究雖有很大進展，但仍存在一些問題。主要是：

第一：血清的成份可能有幾百種之多，對其準確的成份、含量及其作用機制仍不清楚，尤其是對其中一些多肽類生長因子、激素和脂類等尚未充分認識，這給研究工作帶來許多困難；

第二：血清都是批量生產，各批量之間差異很大，而且血清保存期至多一年，因此，要保證每批血清的相似性極為困難，從而使實驗的標準化和連續(xù)性受到限制；

第三：不能排除血清中含有易變物質，這被認為是“瓶中惡化”的原因之一