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          來自結(jié)直腸癌的病人類器官原代培養(yǎng)

          來源:伊萊博生物科技(上海)有限公司   2024年04月19日 08:59  
          一、操作步驟

          1.組織 4℃ 條件下從醫(yī)院取回。
          2.消毒取樣的 15ml 管,取出組織,放到 10ml 大皿中。
          3.用含 4 抗的 PBS 溶液浸泡,清洗組織。
          4.再用組織緩沖液浸泡、清洗三遍。
          5.將組織剪成 1mm3 大小的組織塊,轉(zhuǎn)移到 15ml 管中消化。
          6.在 37℃ 水浴鍋中,消化 15min。
          7.取少量液體在顯微鏡下觀察,看到較多的單細(xì)胞和較少的細(xì)胞簇后,終止消化。
          8.用 100μm 篩過濾,然后 300g4℃ 離心 5min,移去上清。
          9.重懸沉淀,轉(zhuǎn)移到 2ml 離心管中,300g4℃ 離心 5min,移去上清。
          10.估算沉淀的細(xì)胞量,以 1:25 的比例添加基質(zhì)膠,重懸。
          11.24 孔板鋪板,冰上操作,每孔點(diǎn)膠 25ul。
          12.鋪板后,放到 37℃ 細(xì)胞培養(yǎng)箱中 15min 成膠。

          13.然后每孔添加 600ul 結(jié)直腸癌類器官培養(yǎng)基,放到 37℃ 細(xì)胞培養(yǎng)箱中。


          二、結(jié)果展示

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