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實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀（QuantitativeReal-timePCR，簡(jiǎn)稱qPCR儀）的工作原理基于PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)，并結(jié)合了熒光檢測(cè)技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了對(duì)DNA或RNA模板的實(shí)時(shí)、定量分析。
在實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀中，首先設(shè)計(jì)特定的引物和熒光探針，這些引物和探針能夠特異性地結(jié)合到目標(biāo)DNA或RNA序列上。然后，將待檢測(cè)的樣本、引物、探針和PCR反應(yīng)體系混合，放入qPCR儀中進(jìn)行PCR擴(kuò)增。
在PCR擴(kuò)增過程中，qPCR儀會(huì)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)的強(qiáng)度。當(dāng)探針與目標(biāo)序列結(jié)合后，熒光信號(hào)會(huì)顯著增強(qiáng)，且熒光信號(hào)的強(qiáng)度與目標(biāo)序列的擴(kuò)增量成正比。因此，通過監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)的變化，可以實(shí)時(shí)了解PCR擴(kuò)增的進(jìn)程和產(chǎn)物的生成情況。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀的應(yīng)用非常廣泛，主要包括基因表達(dá)分析、疾病診斷、病原微生物檢測(cè)、藥物研發(fā)等領(lǐng)域。例如，在基因表達(dá)分析中，qPCR儀可以精確測(cè)定特定基因在細(xì)胞或組織中的表達(dá)水平；在疾病診斷中，qPCR儀可以快速檢測(cè)病原體或遺傳突變，為疾病的早期診斷和治療提供重要依據(jù)。此外，實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀還可以用于藥物研發(fā)中的基因表達(dá)分析和藥物篩選等工作。
總之，實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀以其高效、準(zhǔn)確、靈敏的特點(diǎn)，在生命科學(xué)研究和醫(yī)學(xué)診斷中發(fā)揮著越來越重要的作用。
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