NuSmart®核酸直接釋放技術(shù)在血液中應(yīng)用
NuSmart®核酸直接釋放技術(shù)能夠在不使用機(jī)械力、蛋白酶K、氯仿/無(wú)水乙醇的條件下,通過(guò)破壞細(xì)胞壁和/或細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)釋放細(xì)胞內(nèi)物質(zhì),進(jìn)一步破壞細(xì)胞核膜結(jié)構(gòu),從而達(dá)到從全血或抗凝血中釋放核酸DNA的目的。整個(gè)步驟如下圖:
使用NuSmart®核酸直接釋放技術(shù),只需要10μL甚至更少的抗凝血就能夠釋放出全部的基因組DNA。而抗凝血中釋放的抑制物從不同程度降低PCR的靈敏度和準(zhǔn)確性。不同的抗凝劑成分對(duì)PCR擴(kuò)增也有強(qiáng)抑制,為了解決這一問(wèn)題,NuSmart®血液PCR試劑盒添加有納米物質(zhì)吸附抑制物,以幫助下游PCR、qPCR、LAMP、RPA、STR等順利完成。
當(dāng)檢測(cè)量逐年遞增,實(shí)驗(yàn)室常用的提取方法不足以滿足臨床篩選需要,NuSmart®核酸直接釋放技術(shù)應(yīng)運(yùn)而生,能夠解決低樣本量,高檢測(cè)通量的問(wèn)題。而且整個(gè)過(guò)程不使用蛋白酶K,不使用有毒有害有機(jī)試劑,無(wú)需配備高額設(shè)備即可完成。
—對(duì)樣本量要求低
—操作簡(jiǎn)單快速
—室溫可處理
—不用液氮研磨
—不用離心
—不使用蛋白酶和有機(jī)試劑
案例 經(jīng)過(guò)處理的小鼠EDTA血和枸櫞酸鈉血擴(kuò)增10對(duì)引物
1:小鼠EDTA血 2 小鼠枸櫞酸鈉血 +:柱提基因組陽(yáng)性對(duì)照 -:陰性對(duì)照
使用NuSmart®血液 PCR 試劑盒(貨號(hào)Nu-B01)處理小鼠EDTA抗凝血和枸櫞酸鈉抗凝血,使用2×Master TaqMix(With Dye)擴(kuò)增分別擴(kuò)增10對(duì)引物。
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