【瑞士步琦】SFC分離木犀草素的應(yīng)用
瑞士步琦
SFC 分離木犀草素
SFC應(yīng)用
”
1
簡(jiǎn)介
紫蘇(Perilla frutescens)是一種草本植物,其葉和種子中含有多種生物活性成分,包括木犀草素(Luteolin),這是一種具有多種藥理作用的黃酮類化合物。木犀草素具有抗氧化、抗炎、抗腫瘤等生物活性。
▲ Luteolin
采用傳統(tǒng)的 Prep HPLC 方式雖然可以將木犀草素從紫蘇提取物中進(jìn)行分離,但是制備時(shí)間較長(zhǎng)且流動(dòng)相損耗量較高,無(wú)論從時(shí)效性還是經(jīng)濟(jì)效益角度出發(fā),都不是最佳的選擇。
2
常規(guī)制備色譜洗脫條件
C18, 10x250mm, 15um
梯度洗脫, 水/乙醇 +1% 甲酸
進(jìn)樣量:0.5mL
流速:15mL/min
▲ 木犀草素色譜峰在 36min 之后
除了洗脫時(shí)間較長(zhǎng)之外,由于流動(dòng)相中水的存在,也給后續(xù)木犀草素樣品的濃縮帶來(lái)一定的麻煩。(即使步琦的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀能夠解決這一問(wèn)題)。
3
采用 SFC 樣品純化
那么是否可以采用超臨界流體色譜(SFC)的方式進(jìn)行樣品的純化呢?
首先我們采用 Sepmatix SFC 8X 平行液相色譜快速篩選適合于木犀草素分離的色譜柱。
實(shí)驗(yàn)條件:
流速:3mL/min
運(yùn)行時(shí)間:15min
梯度洗脫 10-60% 甲醇
▲ 紫蘇提取物在 PEI 色譜柱上具有更好的分離效果
之后采用 Prep SFC-50 對(duì)樣品進(jìn)行大量分離與制備。
實(shí)驗(yàn)條件:
PEI, 10x250mm, 5um
梯度洗脫 20-40% 甲醇 5min
進(jìn)樣量:0.3mL
流速:20mL/min
▲ 木犀草素色譜峰在 2min 之后
兩種不同分離方式對(duì)比:
萃取條件 | Prep HPLC | Prep SFC |
木犀草素色譜峰 | 36min 之后 | 2min 之后 |
總運(yùn)行時(shí)長(zhǎng) | 42 min + 15 min平衡 | 8 min + 1 min 平衡 |
總?cè)軇┦褂?/p> | 390ml ethanol + 240ml water | 50 ml methanol |
4
實(shí)驗(yàn)結(jié)論
通過(guò)對(duì)比發(fā)現(xiàn),SFC 在分離木犀草素的過(guò)程中,無(wú)論從時(shí)效性還是溶劑消耗量上都優(yōu)勢(shì)明顯。
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