Gibco DMEM培養(yǎng)基簡介
Gibco DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)培養(yǎng)基是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的一種培養(yǎng)基,由Gibco公司(現(xiàn)為Thermo Fisher Scientific的一部分)生產(chǎn)。DMEM培養(yǎng)基是基于Eagle's最初設(shè)計的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,并在此基礎(chǔ)上做了多項修改,以適應(yīng)更多類型的細(xì)胞培養(yǎng)需求。
DMEM培養(yǎng)基的特點
高葡萄糖濃度:DMEM有幾種不同的配方,其中包括高葡萄糖(4.5 g/L)和低葡萄糖(1.0 g/L)版本。高葡萄糖版本特別適合能量需求高的細(xì)胞類型,如快速增殖的腫瘤細(xì)胞和干細(xì)胞。
氨基酸和維生素的補充:DMEM培養(yǎng)基中富含多種必需氨基酸和維生素,這些成分對于支持細(xì)胞的生長和代謝非常重要。氨基酸是蛋白質(zhì)合成的基礎(chǔ),而維生素則參與了多種代謝途徑。
鈣和鎂的存在:DMEM培養(yǎng)基含有鈣和鎂離子,這些離子在細(xì)胞信號傳導(dǎo)、黏附和分裂中起著重要作用。
碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng):DMEM培養(yǎng)基使用碳酸氫鈉作為緩沖系統(tǒng),配合5%的CO2氣體環(huán)境,可以有效維持培養(yǎng)基的pH值在7.2至7.4之間,這一范圍對大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞的生長是理想的。
多樣化配方:Gibco提供多種DMEM配方,以滿足不同實驗需求。除了標(biāo)準(zhǔn)的高葡萄糖和低葡萄糖配方外,還有無丙酮酸鈉版本、無谷氨酰胺版本等,供研究人員選擇。
應(yīng)用領(lǐng)域
DMEM培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于以下研究領(lǐng)域:
哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng):DMEM是哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基之一,適用于各種細(xì)胞系,包括但不限于HeLa細(xì)胞、NIH/3T3細(xì)胞、C2C12肌肉細(xì)胞和胚胎干細(xì)胞等。
病毒研究與生產(chǎn):在病毒學(xué)研究中,DMEM常用于病毒的增殖和生產(chǎn),特別是在哺乳動物細(xì)胞系中培育病毒顆粒。
基因編輯與轉(zhuǎn)染實驗:DMEM培養(yǎng)基在基因編輯(如CRISPR-Cas9)和轉(zhuǎn)染實驗中常被用作細(xì)胞培養(yǎng)基,以確保細(xì)胞在操作前后的良好生長狀態(tài)。
藥物篩選與毒理學(xué)研究:DMEM培養(yǎng)基常用于藥物篩選和毒理學(xué)實驗中,用于評估化合物對細(xì)胞的影響。
使用注意事項
補充成分:DMEM培養(yǎng)基通常需要補充10%的胎牛血清(FBS),以提供額外的生長因子、激素和蛋白質(zhì),支持細(xì)胞的最佳生長。
溫度和pH控制:DMEM培養(yǎng)基在使用前應(yīng)預(yù)熱至37°C,并在5%的CO2培養(yǎng)箱中使用,以保持適宜的pH值。
無菌操作:細(xì)胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求非常高,因此在使用DMEM培養(yǎng)基時,應(yīng)確保所有操作在無菌條件下進(jìn)行,以防止污染。
儲存條件:DMEM培養(yǎng)基應(yīng)儲存在2-8°C的條件下,避免反復(fù)凍融,這可能會破壞培養(yǎng)基中的成分,影響細(xì)胞的生長。
結(jié)論
Gibco DMEM培養(yǎng)基是細(xì)胞生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中的一部分。它的多樣化配方和廣泛適用性使其成為各種細(xì)胞培養(yǎng)實驗。研究人員可以根據(jù)實驗需求選擇合適的DMEM配方,確保細(xì)胞在體外培養(yǎng)中的健康生長和實驗結(jié)果的可靠性
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