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          小鼠心鈉肽ELISA檢測試劑盒操作步驟

          來源:上海莼試生物技術(shù)有限公司   2024年09月05日 23:58  

          小鼠心鈉肽ELISA檢測試劑盒操作步驟:


          1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。


          2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。


          3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。


          4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。


          5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。


          6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。


          7.溫育:操作同3。


          8.洗滌:操作同5。


          9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。


          10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。


          11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。


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