InertSustain C18色譜柱操作說(shuō)明
1.色譜柱信息
InertSustain C18液相色譜柱是在新型高純度球狀硅膠基質(zhì)上鍵合十八烷基的反相分離模式色譜柱,適合用于弱極性至中等極性例如合成藥物、中藥、多肽、有機(jī)酸等的分離。InertSustain C18液相色譜柱從硅膠基質(zhì)的合成,到化學(xué)處理和裝填后的性能檢測(cè),都是在本公司嚴(yán)格的產(chǎn)品控制下進(jìn)行,因此不同批次的柱與柱之間具有優(yōu)異的重現(xiàn)性;通過(guò)獨(dú)有的裝填技術(shù)填裝的色譜柱柱床密度均一穩(wěn)定,從而確保色具有高柱效,硅膠粒徑分布均勻,確保柱壓極低。InertSustain C18液相色譜柱采用改性硅膠基體,惰性化程度很高,端基封尾徹底,即使是酸性和堿性或者金屬配位性化合物化合物分析,也能保持良好的峰型,可以用于方法開(kāi)發(fā)中反相ODS柱的首選色譜柱。
為了能長(zhǎng)期保持InertSustain®C18液相色譜柱的優(yōu)越性能和正確的使用色譜柱,在使用色譜柱之前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。
2.使用前的檢查與須知事項(xiàng)
●檢查包裝箱的外觀有無(wú)異常。
●打開(kāi)包裝,檢查色譜柱的填料名稱(chēng)、尺寸規(guī)格、連接形式是否相符。
●色譜柱中封存流動(dòng)相為乙腈/水或者甲醇/水的混合物,具體比例請(qǐng)參考柱效報(bào)告。
3.色譜柱填料規(guī)格
4.色譜柱安裝與操作
色譜柱在運(yùn)輸過(guò)程中,兩端用堵頭密封。當(dāng)將色譜柱接入色譜儀器系統(tǒng)時(shí),首先請(qǐng)確保系統(tǒng)中的溶劑和液相柱中封存溶劑是互溶的。如果不能互溶,請(qǐng)采用一種能夠與系統(tǒng)及色譜柱都能互溶的溶劑對(duì)系統(tǒng)進(jìn)行充分過(guò)渡之后再將色譜柱連接到系統(tǒng)中,并注意流動(dòng)相的方向要與柱上標(biāo)記的方向保持一致。我公司提供的常規(guī)液相色譜柱標(biāo)準(zhǔn)接頭型式為1/16英寸Waters接頭螺絲型(如下左圖),同時(shí)還有耐高壓液相系統(tǒng)的UP型(如下右圖),如果需要其他接頭形式請(qǐng)另行咨詢。
色譜柱連接好之后,請(qǐng)確認(rèn)無(wú)漏液現(xiàn)象之后再進(jìn)行后續(xù)操作。
新的InertSustain®C18柱是保存在乙腈/水或者甲醇/水的混合溶液中,在儲(chǔ)存和運(yùn)輸過(guò)程中,硅膠填料可能會(huì)干涸,推薦用純的甲醇或乙腈沖洗10~20倍柱體積對(duì)色譜柱進(jìn)行活化,流速?gòu)?/span>0.1mL/min緩慢上升到最佳流速。(如果在活化過(guò)程中即發(fā)現(xiàn)壓力和基線不正常時(shí),請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系我公司工程師處理。)然后再用不含緩沖鹽的流動(dòng)相進(jìn)行平衡20倍柱體積,再
用流動(dòng)相平衡,待壓力和基線穩(wěn)定之后,再進(jìn)樣分析。
5.樣品與流動(dòng)相
為避免色譜柱堵塞,所有樣品及溶劑,包括緩沖溶液在內(nèi),在使用前必須用0.45μm或者0.22 μm的濾膜過(guò)濾。InertSustain®C18色譜柱耐純水能力強(qiáng),可以使用純水或者純的緩沖鹽水溶液作為流動(dòng)相。
6.色譜柱的保養(yǎng)
●pH InertSustain C18色譜柱可在pH1~10范圍內(nèi)使用,為保持色譜柱良好的壽命,請(qǐng)避免較強(qiáng)的酸或堿性樣品或者流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱。
●耐壓常規(guī)色譜柱耐受壓力為20MPa,HP系列耐壓為50MPa,UHPLC系列耐受80MPa,但是正常的壓力建議控制在耐受壓力的2/3以下。長(zhǎng)時(shí)間在高壓下運(yùn)行會(huì)對(duì)色譜柱造成難以修復(fù)的損害,因此系統(tǒng)壓力升高之后,建議盡快排查系統(tǒng),如果是色譜柱壓力升高,請(qǐng)及時(shí)采用適當(dāng)溶劑沖洗色譜柱。
●溫度最高操作溫度為60℃,長(zhǎng)時(shí)間在高溫下操作會(huì)顯著降低色譜柱壽命。
●沖洗
1.新柱平衡:新柱是保存在高比例的有機(jī)溶劑中,建議先采用色譜柱保存流動(dòng)相平衡色譜柱一段時(shí)間,觀察基線和壓力是否正常,然后再通入流動(dòng)相。
如果流動(dòng)相中不使用緩沖鹽或離子對(duì)試劑,直接用流動(dòng)相平衡即可;如果流動(dòng)相使用緩沖鹽,先要用高比例的水相充分過(guò)渡20倍柱體積,然后進(jìn)行流動(dòng)相平衡。
2.使用完畢后的清洗、保存及再使用時(shí)流動(dòng)相的過(guò)渡:
①使用完畢后,先用高比例的水相進(jìn)行沖洗約20倍柱體積。
②如果流動(dòng)相中不使用緩沖鹽或離子對(duì)試劑,上述①完畢后,用100%的有機(jī)溶劑沖洗約20倍柱體積,然后此條件下進(jìn)行保存,再使用時(shí)直接沖流動(dòng)相即可。
③如果流動(dòng)相中使用緩沖鹽或離子對(duì)試劑,上述①完畢后,用100%的有機(jī)溶劑沖洗約20倍柱體積,然后此條件下進(jìn)行保存,再使用時(shí)請(qǐng)務(wù)必用高比例的水相充分過(guò)渡20倍柱體積,再通入流動(dòng)相。
●儲(chǔ)存 色譜柱長(zhǎng)期不用,建議日常沖洗方法完成之后,再用純乙腈或者甲醇沖洗20倍柱體積,然后保存在該流動(dòng)相條件下,之后卸掉色譜柱,兩端用堵頭密封,并放在溫度變化小的場(chǎng)所。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類(lèi)作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。