前言：

厄貝沙坦（irbesartan），適用于治療原發(fā)性高血壓，是一種新型血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑，具有良好的降壓作用和極少的不良反應(yīng)。目前，該藥已列入《國(guó)家基本醫(yī)療保險(xiǎn)藥品目錄》，市場(chǎng)應(yīng)用普遍。厄貝沙坦為2-正丁基-3-[（2'-氰基聯(lián)苯-4-基）甲基]-1，3-二氮雜螺[4，4]-壬-1-烯-4-酮（中間體）與疊氮化鈉（NaN₃）經(jīng)環(huán)加成制得，由合成工藝可知，產(chǎn)品中易引入疊氮根離子。疊氮化物，為劇毒物質(zhì)，因此，對(duì)厄貝沙坦原料進(jìn)行疊氮根離子的控制是十分必要的。

美國(guó)藥典和歐洲藥典均采用離子色譜法測(cè)定疊氮根離子，以100mmol/L的氫氧化鈉為淋洗液，采用強(qiáng)保留離子色譜柱進(jìn)行分離，疊氮根離子限度為不得過(guò)10 mg/L。本方法采用柱切換離子色譜法測(cè)定厄貝沙坦中的疊氮根離子，以90%甲醇為溶劑溶解樣品后直接進(jìn)樣，預(yù)處理柱、富集柱和分析柱以適當(dāng)?shù)姆绞脚c六通閥連接，使之能并聯(lián)、串聯(lián)切換使用。預(yù)處理柱和富集柱作為前處理柱用于色譜柱前的樣品處理，在去除樣品基質(zhì)的同時(shí)富集待測(cè)組分，又可保護(hù)分析柱，延長(zhǎng)分析柱的壽命。該方法操作簡(jiǎn)便，并可在脂溶性藥物的痕量離子測(cè)定中廣泛應(yīng)用。

關(guān)鍵詞：厄貝沙坦；疊氮根；離子色譜；柱切換

1. 實(shí)驗(yàn)方法

1.1儀器配置

1.2實(shí)驗(yàn)材料及輔助設(shè)備

水中疊氮根標(biāo)準(zhǔn)溶液：1000mg/L；

厄貝沙坦原藥；

甲醇，色譜純；

乙腈，色譜純；

系統(tǒng)適應(yīng)性溶液：用90%甲醇溶液配制成Br^-、N₃^-、NO₃^-濃度均為0.2μg/mL的溶液，考察系統(tǒng)適應(yīng)性；

標(biāo)準(zhǔn)溶液：用90%甲醇溶液稀釋疊氮根標(biāo)準(zhǔn)溶液制成疊氮根離子濃度為0.2μg/mL的溶液，備用；

樣品溶液：取厄貝沙坦適量，加90%甲醇溶解并稀釋制成每1mL中約含厄貝沙坦20mg的溶液，備用；

一次性注射器（2mL）；

水系針式過(guò)濾器（0.22μm）；

萬(wàn)分之一電子天平；

實(shí)驗(yàn)用水為皖儀科技超純水凈化器制備，電導(dǎo)率為18.25MΩ·cm（25℃）。

1.3測(cè)試條件

1.4樣品前處理

取厄貝沙坦適量，加90%甲醇溶解并稀釋制成每1mL中約含厄貝沙坦20mg的溶液，備用。

2.結(jié)果與討論

2.1系統(tǒng)適應(yīng)性

取系統(tǒng)適應(yīng)性樣液，按照1.3工作測(cè)試條件得到系統(tǒng)適應(yīng)性譜圖如圖1，測(cè)試結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2線性測(cè)試

依次移取0.04mg/L、0.10mg/L、0.16mg/L、0.20mg/L、0.24mg/L、0.40mg/L的系列標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，按照1.2工作測(cè)試條件得到標(biāo)準(zhǔn)曲線譜圖多點(diǎn)重疊圖如圖2，線性方程見(jiàn)表2，疊氮根離子在該色譜條件下線性相關(guān)系數(shù)R=0.999以上，線性良好。

2.2 樣品測(cè)試

2.2.1 樣品含量測(cè)試

在1.3的工作測(cè)試條件下，對(duì)1.4的前處理后樣品進(jìn)行檢測(cè)。樣品空白譜圖如圖4所示，樣品圖譜如圖5所示，樣品圖譜中的目標(biāo)疊氮根未檢出，最終得到樣品中疊氮根離子的含量如表3所示。（n.d.表示未檢出）

2.2.2標(biāo)準(zhǔn)品重復(fù)性測(cè)試

在1.3的工作測(cè)試條件下，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行重復(fù)性測(cè)試。得到譜圖多點(diǎn)重疊圖如圖6，檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表4，可見(jiàn)N₃^-重復(fù)性試驗(yàn)峰面積RSD為0.416%，保留時(shí)間RSD為0.036%。檢測(cè)可靠，重復(fù)性良好。

2.2.3檢出限和定量限測(cè)試

取標(biāo)準(zhǔn)品溶液，逐級(jí)定量稀釋，進(jìn)樣并記錄色譜圖，定量限（LOQ）以信噪比為10:1的濃度計(jì)算，檢出限（LOD）以信噪比為3:1的濃度計(jì)算。結(jié)果得疊氮根離子的定量限為3.31μg/L，檢出限分別為0.99μg/L。圖7為對(duì)應(yīng)離子色譜圖。最終結(jié)果如表5所示。

2.2.4樣品加標(biāo)測(cè)試

取厄貝沙坦樣品，精密加入標(biāo)準(zhǔn)品溶液，定容至100mL容量瓶，添加水平為50.0μg/L、100.0μg/L、150.0μg/L，按1.4的方法繼續(xù)前處理樣品。在1.3工作測(cè)試條件下，對(duì)前處理后的樣品進(jìn)行檢測(cè)分析。樣品加標(biāo)譜圖如圖8所示，按如下公式計(jì)算回收率，結(jié)果見(jiàn)表6?？梢?jiàn)疊氮根離子回收率范圍92.0~96.0%，結(jié)果良好。

3．結(jié)論

建立了一種離子色譜測(cè)定厄貝沙坦中疊氮根離子的方法。取標(biāo)準(zhǔn)品溶液連續(xù)進(jìn)樣6針，保留時(shí)間的RSD為0.036%，峰面積的RSD為0.416%，表明本方法進(jìn)樣精密度良好。線性良好，相關(guān)系數(shù)0.99956。按疊氮根離子限度的50%、100%、150%濃度進(jìn)行回收率試驗(yàn)，回收率在92.0%~96.0%之間，回收率良好。疊氮根離子的定量限和最低檢出限分別為3.31μg/L、0.99μg/L。

采用皖儀IC6600離子色譜儀搭配柱切換組件，建立離子色譜法測(cè)定厄貝沙坦中的疊氮根離子。樣品通過(guò)前處理，然后經(jīng)離子色譜柱分離，采用外標(biāo)法定量，能夠?qū)?/span>厄貝沙坦中的疊氮根離子進(jìn)行定性、定量分析，該方法簡(jiǎn)單易行，重復(fù)性好，靈敏度、準(zhǔn)確度均能達(dá)到要求，可采用此方法進(jìn)行厄貝沙坦中的疊氮根離子的含量測(cè)定。