枸杞多糖是從枸杞子中提取出來的一種水溶性的多糖,主要成分包括甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖。枸杞多糖可以用于食物添加劑,飲料營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑,和化妝品的原料等。
根據(jù)GB/T 44739-2024,枸杞及其制品中枸杞多糖的測(cè)定方法是:離子色譜法。其原理是:樣品經(jīng)乙醇除雜、水回流提取得到枸杞多糖后,用
C?HF?O?消解,產(chǎn)物經(jīng)陰離子色譜柱分離,經(jīng)離子色譜儀測(cè)定,外標(biāo)法定量,以各單糖峰面積為基準(zhǔn)計(jì)算出樣品中枸杞多糖含量。
實(shí)驗(yàn)涉及標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:
單糖標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液:分別準(zhǔn)確稱取100、210、150、60、140、30、510mg和30mg(精確至0.1mg)半乳糖(純度≧98%)、阿拉伯糖(純度≧98%)、葡萄糖(純度≧98%)、鼠李糖(純度≧98%)、木糖(純度≧98%)、甘露糖(純度≧98%)、半乳糖醛酸(純度≧98%)和葡萄糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)品置于50mL燒杯中,用水溶解并轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶,用水定容至刻度,混勻,4℃避光保存。葡萄糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液有效期為2個(gè)月,其他單準(zhǔn)儲(chǔ)備液有效期為6月。
混合單糖標(biāo)準(zhǔn)中間溶液:用Miragen電動(dòng)移液器準(zhǔn)確吸取10mL各單糖標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液,加入100mL容量瓶中,用水稀釋至刻度,混勻,4℃避光保存,有效期為1個(gè)月。
混合單唐標(biāo)準(zhǔn)系列T作溶液:采用50mL規(guī)格的赫施曼opus電子瓶口分配器,設(shè)置stepper模式,設(shè)置兩組分液體積,第1組:0、1、5、10、15mL,第2組:20、25mL,將兩組體積的混合單標(biāo)準(zhǔn)中間溶液分別加入到500mL容量瓶中,用水定容至刻度,混勻配制成不同反量濃度的混合單糖標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶夜,見附錄A中表A.1。
將反相爭(zhēng)化小柱(C18填料)依次用5mL甲醇、10mL水活化,放30min后使用。用Miragen電動(dòng)移液器吸取4mL混合單糖標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液過0.22μm尼龍水系膜后,加載至相凈化小柱(C18填料),去前2~3mL流出液,收集續(xù)濾,待測(cè)。按照設(shè)定的色譜條件,待器穩(wěn)定后,依次測(cè)定混合單糖標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液為色譜峰面積。以各單糖后量濃度為橫標(biāo),以峰面為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線混合單唐標(biāo)準(zhǔn)工作溶液色譜圖見附錄B中圖B1。
實(shí)驗(yàn)室移取小體積(幾微升到10毫升)的液體,一般采用移液器。Miragen電動(dòng)移液器,數(shù)值靠設(shè)定或選定,電機(jī)控制活塞運(yùn)動(dòng),吸液和排液也更加穩(wěn)定,還有步驟少、調(diào)數(shù)快、模式多等諸多優(yōu)勢(shì)。
赫施曼的opus電子瓶口分配器分辨率可達(dá)微升,不僅可用于常規(guī)的等體積分液,一次裝液還可完成10個(gè)不同體積的連續(xù)分液,可用于毫升級(jí)的母液添加和分液,大體積的型號(hào)可代替燒杯、玻璃棒、洗瓶,用于稀釋液的快速、準(zhǔn)確地添加,非常適合做標(biāo)準(zhǔn)曲線和毫升級(jí)大批量灌裝。
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