摘要本應(yīng)用簡(jiǎn)報(bào)介紹了一種利用 Agilent 6470B三重四極桿 LC/MS系統(tǒng)檢測(cè)食品基質(zhì)中244 種農(nóng)藥殘留的 LC/MS/MS 篩查方法。有機(jī)橙子和紅茶由于所含成分復(fù)雜，因此被選擇用于評(píng)估該方法檢測(cè)食品基質(zhì)中農(nóng)藥殘留的性能。在橙子基質(zhì)中，除一種目標(biāo)農(nóng)藥外，其余所有目標(biāo)農(nóng)藥均可在小于或等于歐盟委員會(huì)規(guī)定的默認(rèn)最大殘留量 (MRL) 10 µg/kg 的水平被檢出[1]。在濃紅茶基質(zhì)中，239 種農(nóng)藥可在小于或等于10 µg/kg 的濃度被檢出。研究人員還研究了基質(zhì)效應(yīng)對(duì)分析物響應(yīng)的影響，結(jié)果表明，橙子基質(zhì)和紅茶基質(zhì)中分別有 50% 和 40% 的農(nóng)藥可在 SANTE 指導(dǎo)原則要求的范圍內(nèi) (80%–120%) 得到回收[2]。這些結(jié)果證明，6470B三重四極桿 LC/MS 可滿足高靈敏度要求，能夠?qū)κ称坊|(zhì)中的農(nóng)藥進(jìn)行準(zhǔn)確、精密地定量分析。

前言農(nóng)藥對(duì)于保護(hù)農(nóng)作物起著作用，在大多數(shù)農(nóng)產(chǎn)品的生長(zhǎng)環(huán)境中，為實(shí)現(xiàn)高產(chǎn)量，往往需要使用農(nóng)藥。因此，我們十分關(guān)心所購(gòu)買的農(nóng)產(chǎn)品中是否存在農(nóng)藥及其含量。在如今各類有機(jī)產(chǎn)品和無(wú)機(jī)產(chǎn)品琳瑯滿目的市場(chǎng)上，這一點(diǎn)尤其值得關(guān)注，因?yàn)槭称氛鎮(zhèn)位蚴称肺廴緯?huì)影響有機(jī)食品的質(zhì)量。監(jiān)管機(jī)構(gòu)（例如，美國(guó)環(huán)保局 (US-EPA)[1,3] 和歐盟委員會(huì)[4]）制定了相應(yīng)的法規(guī)來(lái)限制農(nóng)藥的使用以及允許量，從而保證消費(fèi)者購(gòu)買到安全的食品。最大殘留 (MRL) 是指正確使用農(nóng)藥時(shí)（良好的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)方式），食品或飼料內(nèi)部或表面所含法律容許農(nóng)藥殘留的水平。在食品中，典型的 MRL 約為µg/kg 級(jí)（十億分之一 (ppb)），因此需要使用非常靈敏的儀器來(lái)檢測(cè)化合物。對(duì)于紅茶等含有多種內(nèi)源性組分的食品尤其如此，因?yàn)檫@些內(nèi)源性組分會(huì)造成嚴(yán)重基質(zhì)效應(yīng)。

本應(yīng)用簡(jiǎn)報(bào)介紹了一種 LC/MS/MS 篩查方法，該方法可對(duì)復(fù)雜多樣的食品基質(zhì)中所含的 244 種農(nóng)藥進(jìn)行檢測(cè)和定量。將安捷倫農(nóng)藥全套測(cè)試混標(biāo)分別加入有機(jī)紅茶提取物和全橙提取物中。提取物按照下文所述的 Agilent QuEChERS 萃取和 EN 分散 SPE 方案制備。將 Agilent1290 Infinity II 液相色譜與 6470B 三重四極桿 LC/MS 聯(lián)用，以動(dòng)態(tài)多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(dMRM) 方法分析樣品。6470B 三重四極桿 LC/MS 進(jìn)行了多方面的硬件改進(jìn)，例如采用 VacShield 技術(shù)，離子源無(wú)需放空即可維護(hù)，有利于延長(zhǎng)儀器正常運(yùn)行時(shí)間；采用更快速的電子器件，具有改善的穩(wěn)定時(shí)間參數(shù)，能夠在極低的駐留時(shí)間下保證色譜峰重現(xiàn)性。

實(shí)驗(yàn)部分試劑與標(biāo)準(zhǔn)品本研究使用了安捷倫農(nóng)藥全套測(cè)試混標(biāo)（部件號(hào) 5190-0551）。將農(nóng)藥全套測(cè)試混標(biāo)的八種子混合物進(jìn)行混合，然后用乙腈 (ACN) 稀釋得到最終農(nóng)藥工作溶液，該溶液濃度為 10 µg/g。將該溶液加入 QuEChERS 提取物中用于制備校準(zhǔn)樣品。為確定樣品基質(zhì)中的方法檢測(cè)限(MDL) 和定量下限 (LLOQ)，使用紅茶和有機(jī)橙樣品提取物分別制備了 7 個(gè)濃度在0.5–100 ppb 之間的校準(zhǔn)樣品。所有試劑和溶劑均為 HPLC 或 LC/MS 級(jí)。乙腈和甲醇購(gòu)自 Honeywell (Morristown,NJ, USA)。超純水產(chǎn)自配備 LC-Pak Polisher和 0.22 µm 膜式終端過(guò)濾器濾芯的 Milli-QIntegral 系統(tǒng) (EMD Millipore, Billerica, MA,USA)。甲酸和甲酸銨購(gòu)自 Fluka（SigmaAldrich 公司，St. Louis, MO, USA）。樣品前處理有機(jī)散葉紅茶和有機(jī)橙購(gòu)自當(dāng)?shù)仉s貨店。用 8 mL 水將 2 g 茶葉樣品潤(rùn)濕，并使樣品在室溫下溫育 2 小時(shí)。利用陶瓷均質(zhì)子（部件號(hào) 5982-9312）制出充分混合的均勻橙子樣品，并稱取 10 g 樣品用于提取。用 10 mL 乙腈通過(guò)劇烈振搖對(duì) 2 g 固體茶樣品和 10 g 固體橙子樣品萃取 1 分鐘。分別向各混合物中加入一袋安捷倫 EN 方法萃取鹽（部件號(hào) 5982-6650），振搖 1 分鐘，然后在 3000 ×g 下離心 5 分鐘。將6 mL 茶葉上清液加入用于高色素 EN 方法的 Agilent QuEChERS 分散 SPE 管（部件號(hào) 5982-5356）中。同樣，將 6 mL 橙子上清液加入用于含色素的水果和蔬菜 EN的 Agilent QuEChERS 分散 SPE 管（部件號(hào) 5982-5256）中。將兩者振搖 1 分鐘，然后在 3000 ×g 下離心 5 分鐘。收集所得上清液，并通過(guò) 0.45 µm 針頭過(guò)濾器過(guò)濾。將之前制備的農(nóng)藥工作溶液以相對(duì)原固體食物基質(zhì)干重 100 ng/g (ppb)的濃度加入紅茶和橙子提取物中。用適當(dāng)?shù)幕|(zhì)進(jìn)一步稀釋樣品，獲得 0.5、1、5、10、20、50 和 100 ppb 七個(gè)濃度水平的農(nóng)藥校準(zhǔn)樣品，需在進(jìn)樣前立即制備，每個(gè)濃度重復(fù)進(jìn)樣六次。將農(nóng)藥也加入純乙腈中，比較 10 ng/g 濃度下兩種基質(zhì)的信號(hào)回收率。