臨床級干細胞庫是標準化收集、處理、儲存、檢測和分發(fā)不同來源的干細胞以及與干細胞相關的臨床、病理、治療、隨訪、知情同意等資料，并進行質(zhì)量控制、信息管理與應用的專門機構或部門。以下是環(huán)揚實驗室對臨床級干細胞的建設與管理的詳細分析：

一、臨床級干細胞庫的建設

1. 規(guī)劃

• 臨床級干細胞庫的規(guī)劃需綜合考慮多方面因素，如國家政策導向、區(qū)域干細胞醫(yī)療市場需求、技術發(fā)展、建設的必要性、生產(chǎn)條件、經(jīng)濟效益、社會效益、風險等，進行評價、分析和論證，以確定其可行性。

• 臨床級干細胞庫建設應遵循國家法律法規(guī)及國際干細胞研究協(xié)會相關倫理原則，樣本采集與干細胞存儲須遵守《人類遺傳資源管理暫行辦法》，在人類遺傳資源辦批準的范圍內(nèi)開展工作。

2. 選址

• 臨床級干細胞庫應選擇安全、無干擾的獨立與封閉區(qū)域，遠離嚴重污染（空氣、水、病原微生物、放射性同位素等），遠離振動/噪聲。

• 盡可能毗鄰樣本采集與臨床治療點，減少樣本的轉(zhuǎn)運時間，便于及時處理與制備，實現(xiàn)流程無縫對接。

• 存儲區(qū)優(yōu)先選擇地面以上較低樓層，避免雨水/洪水倒灌，防霉防潮，保持良好的溫濕度。

3. 功能區(qū)規(guī)劃與管理

• 細胞制備的潔凈區(qū)域應具備緩沖區(qū)、更衣室，滿足細胞的分離、擴增與培養(yǎng)，各制備套間周圍設置潔凈的走廓，增加流程的靈活性。

• 細胞制備操作區(qū)應設立潔凈區(qū)，根據(jù)《GB50073潔凈廠房設計規(guī)范》，潔凈區(qū)面積規(guī)劃一般為2~4m2/人，潔凈區(qū)滿足GMP要求，其設計、建設、管理、進出、使用、清潔、消毒、環(huán)境檢測等參見《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》無菌藥品附錄。干細胞制劑的生產(chǎn)必須在B級背景下的潔凈區(qū)完成。

• 根據(jù)功能需求杜絕污染，必要時設置隔離區(qū)，避免隔離區(qū)的空氣進入其他區(qū)域。為減少不同批次細胞在研究中的變異性，在制備階段應對同一批特定代次的細胞建立多級細胞庫區(qū)，庫區(qū)應防止混淆、差錯和交叉污染。

• 核心功能區(qū)：涵蓋樣本與細胞收發(fā)室、制備與處理室、存儲區(qū)、質(zhì)檢室與總控室，必要時設置接待征詢室和采集室。

• 輔助功能區(qū)：包括辦公室、會議室、檔案室、庫房及洗消室等。

• 流程與流向：布局的流程與流向應合理有序并明確標識，設置人員、物料、細胞、污物流向與醫(yī)療廢棄物專用通道，確保生物安全，減少污染風險。為了便于樣本、試劑、物料與細胞制劑按規(guī)定的流程和流向傳遞，可在入口與出口處合理設置傳遞窗，提高工作效率。

4. 人員配備

• 應建立與業(yè)務相適應的組織架構，明確管理路徑、職責、權限及相互關系，配備相應資質(zhì)（職稱、學歷、培訓和實踐經(jīng)驗）的操作人員和管理人員。

• 對人員培訓、考核并評估效果，采集人員需經(jīng)培訓合格并持有醫(yī)師或護士執(zhí)業(yè)證書，采集信息雙人復核；制備人員應進行無菌服穿戴的培訓；制備、質(zhì)量管理負責人與質(zhì)量受權人不得相互兼任。如個別崗位職責需委托他人，受委托人應同樣滿足該崗位職責的資質(zhì)要求，委托人仍然承擔最終責任。

5. 設施與設備

• 應為所有設施設備設計充足合理的空間，根據(jù)各區(qū)域面積及功能規(guī)劃供暖、通風（自然/壓力）、空調(diào)、水電、照明、滅菌、監(jiān)控、溫濕度、氧濃度、消防、污水與醫(yī)療廢棄物處理系統(tǒng)等，并定期清潔、維保、校準和質(zhì)檢，制定應急預案。

• 存儲庫區(qū)應充分考慮樓面承重，設施設備規(guī)劃與安全管理遵循《ISBER最佳實踐2018》，如配備雙路供電或應急發(fā)電設施及備用存儲空間、冷鏈監(jiān)控等；縮短液氮塔到庫區(qū)的距離，減少氮氣的耗損；液氮與干冰區(qū)域應配備氣體監(jiān)測器、聲光報警和排風系統(tǒng)，一旦房間內(nèi)氧濃度低于設定的下按規(guī)定時間自動啟動強排風，液氮區(qū)地面杜絕使用磁磚，優(yōu)選耐低溫的環(huán)氧樹脂，冰箱區(qū)應充分考慮散熱，必要時安裝專用散熱通道。操作人員應配備厚型隔熱手套、護目鏡/面具以及防護外套以確保安全。

• 干細胞制劑的存儲須杜絕交叉污染，設置合格、待檢與不合格區(qū)且標識明顯；集約設計監(jiān)控裝置，實現(xiàn)24小時溫度連續(xù)監(jiān)控及遠程報警，確保液體供氣系統(tǒng)不間斷供氣及外置塔的安全運轉(zhuǎn)（儲存、調(diào)壓、氣化等），設置保護圍欄和安全警示標識并定期安全檢查，校驗供氣管道與遠程液位監(jiān)控系統(tǒng)。對于液氮補給罐或液氮輸送系統(tǒng)所有閥門、壓力表與安全閥應定期檢查（年檢或強檢），確保系統(tǒng)連續(xù)平穩(wěn)、安全節(jié)氣。液氮設備的運行與維修人員應具備《特種行業(yè)資格證》，可外包給專業(yè)公司進行檢修。

• 所有設備應建檔受控，專人管理且標識明顯，分光光度計、移液器、天平、離心機等需定期進行計量檢定與校準。實驗室要備的安全設施（通風櫥、防塵罩、滅火器、洗眼噴淋裝置等）應定期進行檢查。

二、臨床級干細胞庫的管理

1. 采集管理

• 采集前需對供者進行入組篩查和傳染病因子檢測，包括人類免疫缺陷病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人類嗜T細胞病毒、EB病毒、巨細胞病毒、梅毒螺旋體等。

• 篩查合格的供者簽署知情同意書后，遵循標準操作規(guī)程采集樣本，將污染、感染和病原體傳播的風險降低。

2. 制備管理

• 臨床級干細胞的制備應嚴謹、審慎并進行獨立審查和監(jiān)督，確保其安全性和有效性。即使對細胞進行最小的體外操作都有可能引入額外風險，如病原體污染、培養(yǎng)代數(shù)增加導致的細胞基因型和表型不穩(wěn)定，在長期、壓力環(huán)境下可能會變?yōu)榉钦扼w或發(fā)生DNA重組、缺失及其他基因或表觀遺傳異常，從而帶來嚴重病理改變，如癌癥。

• 故臨床級干細胞的制備應遵循GMP程序，防止原料和產(chǎn)品在生產(chǎn)過程中被污染，所有試劑與制備過程均應遵守質(zhì)量控制體系與規(guī)程，確保試劑質(zhì)量、制備工藝與制定的方案保持一致，形成細胞鑒定、純度和潛能分析標準。而對于傳染病因子陽性的干細胞制備需在獨立設置的陽性間進行。

3. 檢驗管理

• 利用干細胞庫資源開展臨床研究必須遵循科學與倫理，保護受試者權益，符合《藥物臨床試驗質(zhì)量管理規(guī)范》、《干細胞臨床試驗研究管理辦法（試行）》和《干細胞制劑質(zhì)量控制及臨床前研究指導原則（試行）》。

• 過程中的關鍵性物料必須做到先驗證性能，確保有效性且符合國家相關規(guī)定。直接與原始樣本及干細胞制劑接觸的物料必須無菌且對人體無害并符合要求的級別，盡可能使用藥用級別的物料。記錄使用的關鍵物料，確保可完整準確地追蹤到每個環(huán)節(jié)中物料的詳細信息，包括使用的試劑/耗材/設備清單、生產(chǎn)廠家、批次號、合格證等，關鍵試劑如血清、酶和生長因子的分析證書（certificate of analysis，COA）副本，測試過程和結果等。

4. 存儲管理

• 應監(jiān)測生物安全柜、潔凈室的顆粒及生物負載系統(tǒng)，包括高效微?？諝膺^濾系統(tǒng)、A/B潔凈室內(nèi)的空調(diào)凈化系統(tǒng)。

• 應規(guī)定監(jiān)測頻率和監(jiān)測項目，如靜態(tài)和動態(tài)下的懸浮粒子、沉降菌、浮游菌、表面微生物、壓差、風速、溫濕度等。

• 對于B級背景下應采用在線塵埃粒子監(jiān)測系統(tǒng)懸浮粒子。

• 定期清洗和更換初、中效過濾器，并定期在工作狀態(tài)下對高效過濾器進行檢漏，以防止損傷和泄漏。

綜上所述，臨床級干細胞庫的建設與管理是一項復雜而細致的工作，需要綜合考慮多個方面。通過科學規(guī)劃、嚴格管理、先進技術等方面的努力，可以確保臨床級干細胞庫的安全、高效和可持續(xù)發(fā)展。