目的　分析過(guò)敏性紫癜（HSP）患兒急性期血清白細(xì)胞介素（IL）-10、IL-13、IL-15的水平變化及其與部分免疫學(xué)指標(biāo)的關(guān)系，探討其臨床意義。方法　取40例已確診的HSP患兒血清，其中19例為有腎損害組，21例為無(wú)腎損害組;同時(shí)取20例健康兒童的血清。采用雙抗體夾心ELISA法分別檢測(cè)3組血清IL-10、IL -13、IL -15的含量。結(jié)果　HSP患兒血清IL-10、IL -13、IL -15水平均顯著高于正常對(duì)照組（P<0.01），腎損害組血清IL-10、IL -13、IL -15水平均明顯高于無(wú)腎損害組（P<0.05）;HSP組IgA 含量顯著高于對(duì)照組，且腎損害組IgA含量明顯高于無(wú)腎損害組（P<0.05）。經(jīng)相關(guān)性分析IL-10、IL -13、IL -15與IgA明顯相關(guān)。結(jié)論　 HSP存在細(xì)胞免疫與體液免疫功能紊亂，血清IL-10、IL -13、IL -15及IgA與HSP、紫癜性腎炎（HSPN）的發(fā)病過(guò)程密切相關(guān)。

　　　　過(guò)敏性紫癜（henoch -schonlein purpura，HSP）是小兒時(shí)期zui常見(jiàn)的小血管炎綜合征之一，也是繼發(fā)性腎臟損害的主要原因，可由多種因素引起，目前病毒感染是zui常見(jiàn)的病因[1]。臨床主要表現(xiàn)為血小板不減少性皮膚紫癜，常伴有消化道癥狀（腹痛或便血）、關(guān)節(jié)癥狀、腎臟癥狀（蛋白尿或血尿）。該病容易反復(fù)發(fā)作，且易累及腎臟引起紫癜性腎炎（HSPN）。HSP在大多數(shù)情況下是一種自限性疾病，但是長(zhǎng)期預(yù)后取決于其腎損害的嚴(yán)重程度[2]。該病發(fā)病機(jī)制仍不清楚，但已經(jīng)明確它是一種系統(tǒng)性免疫復(fù)合物性疾病，多為IgA循環(huán)免疫復(fù)合物相關(guān)的小血管及毛細(xì)血管損害[3]。為探討白細(xì)胞介素（IL）-10、IL-13、IL -15與HSP、HSPN發(fā)病機(jī)制及某些免疫學(xué)指標(biāo)的關(guān)系，本研究對(duì)2010年9月-2011年5月在我院住院的40例確診為HSP的患兒及20例健康兒童血清進(jìn)行了檢測(cè)，現(xiàn)報(bào)告如下。

　　1　材料和方法

　　1.1　研究對(duì)象

　　根據(jù)《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》第7版HSP診斷標(biāo)準(zhǔn)，選擇我院兒科2010年9月-2011年5月確診為HSP的住院患兒40例，男20例，女20例，年齡3～14歲，平均（8.4±3.1）歲。根據(jù)皮疹消退前和消退后2周內(nèi)有無(wú)腎臟受累的臨床證據(jù)分為有腎損害組和無(wú)腎損害組，診斷標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)分會(huì)腎臟病學(xué)組“紫癜性腎炎的診斷與治療”的建議[4]。其中有腎損害組19例，男10例，女9例，年齡5～14歲，平均（8.6±2.9）歲;無(wú)腎損害組21例，男10例，女11例，年齡3～12歲，平均（8.1±3.3）歲。排除使用過(guò)甾體類(lèi)或非甾體類(lèi)抗炎藥物及激素的患兒。正常對(duì)照組20例，系同期體檢健康兒童（無(wú)任何感染及系統(tǒng)性疾病的兒童），男女各10例，年齡4～14歲，平均（8.3±0.7）歲。實(shí)驗(yàn)組與健康對(duì)照組在性別和年齡上差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

　　1.2　儀器與方法

　　分別取HSP患兒和正常兒童靜脈血2mL，即刻放入無(wú)任何添加劑的真空采血管中靜置30min,3000r?min-1離心15min后收集血清，置-80℃冰箱冷藏備用。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）分別測(cè)定血清IL-10、IL-13、IL-15含量。試劑盒由上海森雄科技有限公司提供，靈敏度為8 pg?mL-1，操作步驟嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，酶標(biāo)儀為芬蘭DENLEY DRAGON Wellscan MK 2型。免疫球蛋白（Ig）A、Ig G、Ig M、C3采用免疫散射比濁法測(cè)定。

　　1.3　統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

　　采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件;非正態(tài)分布數(shù)據(jù)，以中位數(shù)（四分位數(shù)間距）表示，兩獨(dú)立樣本比較采用Wilcoxon秩和檢驗(yàn);正態(tài)分布數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x-±s）表示，兩獨(dú)立樣本比較采用t檢驗(yàn)，采用Spearman作相關(guān)性分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

　　2　結(jié)果

　　2.1　HSP組與正常對(duì)照組血清IL-10、IL-13、IL-15檢測(cè)結(jié)果

　　HSP急性期患兒血清IL-10、IL-13、IL-15的含量均顯著高于正常對(duì)照組的含量，見(jiàn)表1。

　　2.2　HSP患兒有腎損害組與無(wú)腎損害組血清IL-10、IL-13、IL -15檢測(cè)結(jié)果

　　HSP患兒有腎損害組血清IL-10、IL-13、IL -15的含量明顯高于無(wú)腎損害組的含量，見(jiàn)表2。

　　2.3　HSP組與正常對(duì)照組IgA、Ig G、Ig M、C3的檢測(cè)結(jié)果

　　HSP患兒僅有IgA的含量明顯高于正常對(duì)照組的含量， Ig G、Ig M、C3的含量與正常對(duì)照組的含量比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表3。表1　HSP患兒急性期組與正常對(duì)照組血清IL-10、IL-13、IL -15水平的比較表2　HSP有腎損組與無(wú)腎損組血清IL-10、IL-13、IL -15水平的比較

　　2.5　相關(guān)性分析

　　將IL-10、IL-13、IL -15分別于IgA作相關(guān)性分析，呈明顯正相關(guān)（r=0.578、0.439、0.501，P<0.01）。

　　3　討論

　　近年來(lái)，由于大量研究表明HSP 存在細(xì)胞免疫功能低下，體液免疫功能亢進(jìn)，使細(xì)胞因子與T細(xì)胞與B細(xì)胞之間的相互關(guān)系成為研究熱點(diǎn)。HSP及HSPN患兒均存在細(xì)胞因子分泌紊亂的現(xiàn)象[5-6]。IL-10和IL-13主要是由活化的Th2細(xì)胞產(chǎn)生的能抑制多種細(xì)胞因子分泌的抗炎性細(xì)胞因子。在本研究中，HSP患兒急性期血清IL-10和IL-13顯著高于正常對(duì)照組，推測(cè)這些因子在HSP發(fā)病過(guò)程中反饋性增高，發(fā)揮一定的保護(hù)作用。IL-10可以抑制IL-1、IL-6、IL-8、IL-12、TNF-α、粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF）等炎癥性細(xì)胞因子的基因轉(zhuǎn)錄和蛋白合成，從而起到抗炎作用。IL-10還具有減弱TNF-α表面受體的表達(dá)及抑制其釋放的功能，使其致炎作用減弱。IL-13可以抑制活化單核細(xì)胞產(chǎn)生IL-1α、IL-1β、IL-6、TNFα等炎性細(xì)胞因子及巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1α（MIP-1α）、IL-8、IL-10、IL-12、GM-CSF、G-CSF等化學(xué)趨化因子，抑制這些細(xì)胞因子的基因轉(zhuǎn)錄，從而起到抗炎作用。IL-13可下調(diào)IFN-α、IL-12α、β鏈的轉(zhuǎn)錄水平，增強(qiáng)IL-1受體拮抗劑（IL-1ra）產(chǎn)生，而IL-1ra可阻斷IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8發(fā)揮抗炎活性。

　　IL-15是一種Th1型細(xì)胞因子，它可以促進(jìn)Th0向Th1轉(zhuǎn)化;IL-15可增加bcl-2基因的表達(dá)，起到間接抑制淋巴細(xì)胞凋亡的作用，致使外周自身反應(yīng)性B細(xì)胞增多，導(dǎo)致免疫球蛋白產(chǎn)生增多，免疫復(fù)合物增多，從而促使HSP的發(fā)生發(fā)展。IL-15與CD40配體協(xié)同誘導(dǎo)B細(xì)胞增殖和分泌IgM、IgG1、IgA以及低水平的IgG2，使體液免疫功能亢進(jìn)，導(dǎo)致免疫復(fù)合物增多，促進(jìn)血管炎的發(fā)生。IL-15能單獨(dú)或與其他因子協(xié)同使募集到的T細(xì)胞獲得單核或巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)分泌TNF-α的能力，從而啟動(dòng)包括IL-1、IL-6、IL-8、GM-CSF、MIP-Iα、MIP-Iβ等一系列下游因子在內(nèi)的炎癥反應(yīng)，促進(jìn)HSP的發(fā)生。因此，IL-15在HSP患兒急性期會(huì)升高。HSP患兒細(xì)胞因子分泌的紊亂導(dǎo)致了Th1/Th2之間的失衡。

　　免疫復(fù)合物誘導(dǎo)性腎臟損傷是HSPN的主要發(fā)病機(jī)制，是兒童繼發(fā)性腎小球疾病中的一個(gè)重要類(lèi)型，也是小兒終末期腎臟病的重要原因，是引起本病死亡的主要原因。本文進(jìn)一步研究了HSP患兒血清IL-10、IL-13、IL-15水平與腎損害發(fā)生的關(guān)系。結(jié)果顯示，臨床發(fā)生腎損害者IL-10、IL-13、IL-15水平均明顯高于無(wú)腎損害者。對(duì)于HSPN活動(dòng)期IL-10和IL-13產(chǎn)生增多的原因，可能是因?yàn)镠SPN中由于腎臟原有細(xì)胞和局部浸潤(rùn)的炎癥細(xì)胞所分泌的炎癥介質(zhì)增加，單核細(xì)胞（PBMC）在這些介質(zhì)刺激后被活化，從而誘導(dǎo)IL-10和IL-13的產(chǎn)生增多。增多的IL-10和IL-13又可以通過(guò)抑制巨噬細(xì)胞等一些炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)及炎癥介質(zhì)的釋放，同時(shí)也相對(duì)抑制Th1細(xì)胞的作用，從而維持T細(xì)胞亞群功能的平衡。IL-15可刺激T、B淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞的增生活化，促進(jìn)B細(xì)胞分泌免疫球蛋白，增加免疫復(fù)合物在腎臟的沉積。此外，Eini H[7]等研究提示腎細(xì)胞可表達(dá)IL-15和IL-15受體（IL-15r），尤其是在免疫介導(dǎo)的腎臟疾病中，腎細(xì)胞分泌的IL-15導(dǎo)致腎間質(zhì)淋巴細(xì)胞的活化和增生，進(jìn)而引起間質(zhì)損傷，這也可能是HSP腎損害組 IL-15含量明顯高于無(wú)腎損組的原因。IL-15可明顯增加微小病變型腎小球腎炎中腎小球通透性因子（VPF）的釋放，而VPF是一種淋巴因子能導(dǎo)致腎血管通透性增高、尿蛋白增多，同時(shí)VPF也是局灶節(jié)段性腎小球硬化蛋白尿產(chǎn)生的主要原因。因此提示IL-15通過(guò)多途徑參與了HSPN的發(fā)病過(guò)程。

　　HSP的患兒體液免疫功能上調(diào)，B細(xì)胞呈多克隆活化，尤以IgA為主[8]。本研究中，HSP患兒IgA含量明顯高于正常對(duì)照組含量，IgG、IgM與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與之前學(xué)者們的研究相符[9]。大量研究表明HSP患者血中IgA明顯增高[10-12]，皮膚、腎臟及消化道黏膜中也均有IgA沉積[13]，這可能與黏膜免疫系統(tǒng)對(duì)進(jìn)入自身的抗原產(chǎn)生免疫應(yīng)答有關(guān)，致使IgA增多。另外腎小球及系膜區(qū)也有IgA的明顯聚集，提示其在HSPN的形成過(guò)程中可能有一定的致病作用。另有研究認(rèn)為IgA分子的異常糖基化可減少肝臟對(duì)血清中IgA的清除，從而使其血濃度升高，增多的 IgA與腎小球系膜細(xì)胞、細(xì)胞外基質(zhì)的結(jié)合從而引起炎癥反應(yīng)。也有研究提示IgA糖基的改變，使IgA可識(shí)別腎小球膜上內(nèi)源性的凝集素并與之結(jié)合，引導(dǎo)IgA的沉積。本文還對(duì)IgA與IL-10、IL-13、IL-15進(jìn)行了相關(guān)性分析，IgA與IL-10、IL-13、IL-15均明顯相關(guān)，進(jìn)一步說(shuō)明了它們共同參與了HSP發(fā)病過(guò)程。急性期HSP患兒補(bǔ)體含量與對(duì)照組沒(méi)有明顯區(qū)別，不支持補(bǔ)體激活在HSP發(fā)病中起作用。