應(yīng)用植物激素(Planthormone)抗體進(jìn)行免疫定量
植物激素(Planthormone)是植物體內(nèi)合成的對植物生長發(fā)育有顯著作用的幾類微量有機(jī)物質(zhì),包括生長素(Auxin)、赤霉素(GA)、細(xì)胞分裂素(CTK)、脫落酸(ABA)、茉莉酸、激動素和乙烯(ETH)等(點(diǎn)擊此處查看“Agrisera植物激素抗體產(chǎn)品信息”)。它們都是些簡單的小分子有機(jī)化合物,但它們的生理效應(yīng)卻復(fù)雜多樣。其介導(dǎo)的植物細(xì)胞功能包括了從影響細(xì)胞的分裂、伸長、分化到影響植物發(fā)芽、生根、開花、結(jié)實(shí)、性別的決定、休眠和脫落等各個環(huán)節(jié)。
對植物激素進(jìn)行免疫定量的方法主要有放射免疫分析(RIA)和酶聯(lián)吸附免疫分析(ELISA),由于前者操作上欠安全等原因,目前常采用后一種類型。在ELISA中,抗原抗體反應(yīng)的檢測依靠酶標(biāo)記物來實(shí)現(xiàn),常用的酶有辣根過氧化物酶(HRP)和堿性磷酸酯酶(AP)。酶可直接標(biāo)記激素分子,稱為酶標(biāo)植物激素,也可標(biāo)記于第二抗體(識別抗激素抗體Fc片段的抗體或金黃色葡萄球菌A蛋白),稱為酶標(biāo)二抗。這兩類標(biāo)記物分別用于固相抗體型和固相抗原型ELISA。
固相抗體型ELISA:將抗激素的單克隆抗體(Mab)與已吸附于固相載體上的兔抗鼠Ig抗體(RAMIG)結(jié)合,然后加入激素標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品,使其與固相化的Mab結(jié)合,再加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記激素(酶標(biāo)激素)。通過測定酶標(biāo)激素的被結(jié)合量,可換算出未知樣品中激素的數(shù)量。
固相抗原型ELISA:將“激素-蛋白”復(fù)合物(該蛋白應(yīng)不同于免疫原中的載體蛋白)包被于固相載體,加入待測激素(樣品或標(biāo)準(zhǔn)品)和抗激素多克隆抗體(Pab)反應(yīng),進(jìn)行競爭反應(yīng)。然后讓HRP標(biāo)記羊抗兔Ig抗體(HRP-GARIG)與結(jié)合在固相上的Pab反應(yīng),通過測定與固相結(jié)合的酶量,換算出未知樣品中激素的含量。
不論選用的是何種方法,植物激素一抗的特異性、靈敏性直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)結(jié)果。北京西美杰科技有限公司攜手瑞典專業(yè)植物學(xué)抗體公司Agrisera為您提供抗吲哚乙酸、水楊酸、脫落酸、赤霉素、玉米素、激動素、異戊烯基腺嘌呤、6BA、meta-topolin等多種植物激素抗體(點(diǎn)擊此處查看“Agrisera植物激素抗體產(chǎn)品信息”)。
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