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          小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒說明

          來源:上海信然生物技術(shù)有限公司   2014年03月27日 09:33  

          小鼠ELISA試劑盒使用目的:

          用于測(cè)定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中β淀粉樣蛋白1-40Aβ1-40含量。

          實(shí)驗(yàn)原理

          應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠β淀粉樣蛋白1-40Aβ1-40水平。用純化的小鼠β淀粉樣蛋白1-40Aβ1-40抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入β淀粉樣蛋白1-40Aβ1-40),再與HRP標(biāo)記的β淀粉樣蛋白1-40Aβ1-40抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的β淀粉樣蛋白1-40Aβ1-40呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠β淀粉樣蛋白1-40Aβ1-40濃度。

          試劑盒組成

           

          1

          30倍濃縮洗滌液

          20ml×1

          7

          終止液

          6ml×1

          2

          酶標(biāo)試劑

          6ml×1

          8

          標(biāo)準(zhǔn)品(2000μg/L

          0.5ml×1

          3

          酶標(biāo)包被板

          12孔×8

          9

          標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

          1.5ml×1

          4

          樣品稀釋液

          6ml×1

          10

          說明書

          1

          5

          顯色劑A

          6ml×1

          11

          封板膜

          2 

          6

          顯色劑B

          6ml×1/

          12

          密封袋

          1個(gè)

           

          標(biāo)本要求

          1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

          2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性

          計(jì)算

            以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

          注意事項(xiàng)

          1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

          2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

          3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

          4.  請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

          5.  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

          6.底物請(qǐng)避光保存。

          7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

          8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

          9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

          10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。

          小鼠ELISA試劑盒保存條件及有效期

          1.試劑盒保存:;2-8

          2.有效期:6個(gè)月

          免責(zé)聲明

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