一、在色譜前處理中,過濾的重要性
由于色譜系統(tǒng)的精密性和對(duì)結(jié)果分析的準(zhǔn)確性要求,對(duì)樣品的過濾顯得尤為重要。
過濾可以保護(hù)色譜系統(tǒng)和色譜柱,延長柱子的使用壽命,改善數(shù)據(jù)的度。過濾可以消除由于摩擦產(chǎn)生顆粒而引起的壓力波動(dòng)和無規(guī)律的雜質(zhì)引起的基線波動(dòng)??梢韵捎诖嬖跉馀輰?duì)檢測系統(tǒng)的干擾。因此通常采用微孔濾膜來過濾流動(dòng)相,使用針樣品過濾器來過濾樣品。
二、濾膜的相關(guān)參數(shù)及常識(shí)
1.孔徑:孔徑等級(jí)是指通過在十分嚴(yán)格的測試條件下100% 截留下某種特定尺寸的挑戰(zhàn)菌來區(qū)分孔徑。必須指明的條件里有:測試有機(jī)體(或分子)尺寸及濃度,測試壓力和檢測法。
2.空氣通量:為測量空氣通過濾器之一種方法。即在不同的壓力、不同的孔率和不同濾器面積情況下,空氣所流過的流量。
3.氣泡點(diǎn):在微孔濾膜行業(yè)中,使用特定液體浸濕濾膜,并在特定溫度下,所須排擠出濾膜孔中液體的zui小壓力之稱。
4.過濾器功效:過濾器在其特定壓力下,以其過濾總量和阻礙微粒大小定義其過濾功效。一般來說,阻礙程度及壓力越低時(shí),過濾器的功效越大。
5.濾材壽命:在特定操作條件下,過濾器的zui長使用時(shí)間。它取決于許多因素,例如過濾液的性質(zhì)、操作溫度、過濾材質(zhì)的選擇等。
6.親水性:親水性的濾膜通常有一層特殊化學(xué)層使得濾膜可以被水浸潤; 親水性 是對(duì)水的斥力的一個(gè)參考。疏水性濾膜很少吸水或*不吸水。在觀察上可目視小水液滴停留在濾膜的表面而不會(huì)被表面吸附而擴(kuò)散成水面。疏水性的大小取決于濾材的孔徑和濾膜原料的特性。
7.流率和流量:流率是在特定溫度及壓力下單位時(shí)間內(nèi)過濾液通過濾膜的總量。流率與濾膜表面性質(zhì)有密切關(guān)系。流率和通量是濾材和設(shè)計(jì)性能的二個(gè)重要參數(shù)。這種性能取決于以下幾個(gè)方面:
1)粘性:粘度決定了液體流動(dòng)的難易。液體的粘度越高(在一定的溫度和壓力條件下)流率越低。而要達(dá)到相同流率時(shí)所需的壓力越高。
2)壓力差:過濾中進(jìn)口與出口的壓力差,當(dāng)濾器的滿負(fù)荷時(shí),過濾壓力差增大。
3)孔率:是指濾膜上所有孔的體積占全部濾膜體積的比例。通常濾膜有50-90% 孔面積,流率與膜的孔率有直接的關(guān)系。
三、選擇針樣品過濾器要考慮的因素
微孔濾膜的主要功能是從氣相或者液相中截留微粒,細(xì)菌及其他雜質(zhì),以達(dá)到分離,凈化,提純的目的。因此選擇濾膜要考慮以下幾個(gè)因素:
1.濾膜的材質(zhì)(化學(xué)兼容性):選擇濾膜時(shí),首先要考慮化學(xué)相容性。濾器是否耐酸、堿、有機(jī)溶劑等。
2.濾膜的孔徑:對(duì)于使用3μm或更大粒徑填料的色譜柱系統(tǒng),可采用0.45μm的針樣品過濾器或?yàn)V膜;對(duì)于使小于3μm填料的色譜系統(tǒng),或涉及微生物生長的色譜系統(tǒng),推薦使用0.2μm的濾膜。對(duì)于難處理的混濁溶液,可以使用1-5um的濾膜進(jìn)行預(yù)過濾,然后再用相應(yīng)的濾膜進(jìn)行續(xù)濾。
3.樣品的特性:
1)親水性樣品:選用親水膜片。對(duì)水有親和力,適合過濾水為基質(zhì)的溶液??捎玫臑V膜有:混合纖維素酯,聚醚砜(PEs),Nylon等。
2) 強(qiáng)腐蝕性有機(jī)溶劑:一般采用疏水性膜。如聚四氟乙烯膜(PTFE),聚丙烯(PP)等材質(zhì)的濾膜
3)蛋白溶液:選擇低蛋白吸附的濾膜,如聚偏氟乙烯膜(PVDF)。
4)離子色譜:通常認(rèn)為聚醚砜(PEs)濾膜比較適合低無機(jī)離子的溶液的過濾。
4.選擇針樣品過濾器時(shí),除了考慮上述因素外,還要考慮樣品的體積(即選擇什么規(guī)格的針樣品過濾器):通常樣品量小于2ml時(shí),選用
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