今天上海恒遠(yuǎn)生物要給朋友們簡(jiǎn)述的是抗原特性技術(shù)和基本工作原理,抗原有著一個(gè)非常典型的定義,就是進(jìn)入易感動(dòng)物組織后能誘導(dǎo)系統(tǒng)發(fā)生免疫反應(yīng)并能與所產(chǎn)生的特異性抗體結(jié)合的任何外來(lái)物。
優(yōu)良抗原的特性技術(shù)包括了:
·分子內(nèi)部存在維持結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性和化學(xué)復(fù)雜度的區(qū)域;
·存在大量不含高度重復(fù)單元的鏈段;
·zui低分子量為8,000-10,000 Da,但在載體蛋白存在時(shí)可使用分子量低至200 Da的半抗原;
·能夠被免疫系統(tǒng)加工;
·具有能發(fā)生抗體形成機(jī)制的免疫原區(qū);
·結(jié)構(gòu)元件與宿主存在很大差異;
·對(duì)于肽抗原,有些區(qū)域包含至少30%的免疫原性氨基酸:賴(lài)氨酸、精氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺;
·對(duì)于肽抗原,存在大量的親水或帶電殘基。
抗原一般具有高分子量,并且通常為蛋白質(zhì)或多糖類(lèi)。多肽、脂質(zhì)、核酸和其他許多物質(zhì)也可用作抗原。有些小分子物質(zhì)在與大分子載體蛋白發(fā)生化學(xué)結(jié)合時(shí)也可激發(fā)免疫反應(yīng),這些小分子物質(zhì)稱(chēng)為半抗原。多種分子可用作為半抗原。因此,只要時(shí)間足夠,幾乎所有外來(lái)物都能被免疫系統(tǒng)識(shí)別并產(chǎn)生特異性抗體。然而,此特異性免疫反應(yīng)存在很大的差異,主要取決于抗原的大小、結(jié)構(gòu)和組成??乖芤l(fā)強(qiáng)烈免疫反應(yīng),則說(shuō)明其免疫原性很強(qiáng)。
為了使抗原與抗體之間發(fā)生有效作用,表位必須能隨時(shí)進(jìn)行結(jié)合。如果靶分子發(fā)生變性,例如由于固定、還原、pH 變化或凝膠電泳樣品制備期間發(fā)生變性,表位可能發(fā)生改變,從而影響其與抗體的作用能力。
這樣一來(lái),表位可能呈現(xiàn)在抗原的原生細(xì)胞環(huán)境中,或只有在發(fā)生變性時(shí)才會(huì)暴露出來(lái)。它們的自然形式可能為細(xì)胞質(zhì)抗原(可溶)、膜相關(guān)抗原或分泌抗原。表位的數(shù)量、所在區(qū)域和大小取決于抗體產(chǎn)生過(guò)程中所存在的抗原的數(shù)量。
如果所關(guān)注的基因產(chǎn)物表達(dá)量極低,則可選擇使用已知的核苷酸序列信息來(lái)形成一段對(duì)應(yīng)的肽,以產(chǎn)生序列特異性的抗體。在一些情況中,肽抗原比全蛋白抗原具有優(yōu)勢(shì),因?yàn)樗a(chǎn)生的抗體可靶向*的序列區(qū)。這在研究序列同源性很高的家族的蛋白質(zhì)時(shí)特別有用。
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