色氨酸檢測方法

一、標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置

　　準(zhǔn)確稱取色氨酸標(biāo)準(zhǔn)樣品0.0204g，用0.1mol/L氫氧化鈉水溶解并定容至50mL，則色氨酸濃度為2μmol/mL，即20.42mg/100mL。

二、5mol/L的氫氧化鈉的配置方法：

　　準(zhǔn)確稱取200g氫氧化鈉，用水溶解并定容至1L。

二、前處理方法

1、水解：準(zhǔn)確稱量0.3-0.5g樣品于水解管中，加入5mol/L氫氧化鈉10mL，放置30分鐘以上后再封口，放入145℃烘箱中4小時，取出放涼后，直接用漏斗轉(zhuǎn)入50mL容量瓶中，用6mol/L鹽酸中和到中性，用水定容，取適量過0.45μm的濾膜用于衍生。

2、衍生：a、準(zhǔn)確吸取10ul過濾好的樣液注入小試管中。

         b、將小試管放入真空瓶中，在真空泵上抽濾20分鐘，抽濾好后用鑷子取出小試管，看小試管中還有沒有未抽干的樣液。

         c、往抽干的小試管中注入20ul衍生緩沖液放在混勻器上混勻2分鐘，混勻好后再在小試管中注入20ul衍生試劑，再放在混勻器上混勻2分鐘。

         d、用封口膠將混勻好的小試管封口。（封口時要注意不能有漏的地方）。

         e、將封好口的小試管放入60℃的烘箱里烘30分鐘。

         f、將烘好的小試管上的封口膠取掉，用移液槍準(zhǔn)確移取160ul的平衡緩沖液注入小試管中，在混勻器上混勻2分鐘就可以進(jìn)樣了。

注意事項(xiàng)：

1、 樣品加完氫氧化鈉后，要放置30分鐘以上再封口，防止在烘箱中進(jìn)行水解反應(yīng)時爆炸。

2、 從水解管中轉(zhuǎn)入容量瓶時，直接轉(zhuǎn)移，不用濾紙過濾，因?yàn)閴A對濾紙有腐蝕性。

3、 注意檢查小試管有沒有抽干時一定不要倒置，防止有為抽干的樣液損失。

4、 封口時一定要封嚴(yán)。

除氨基酸分析方法包外海需要如下：

需要準(zhǔn)備的試劑：

色氨酸標(biāo)準(zhǔn)品，氫氧化鈉，鹽酸

需要準(zhǔn)備的耗材：

0.45μm的濾膜，50mL容量瓶，移液器槍頭200ul，封口膜，

需要的儀器：

天平，烘箱，移液器200ul