使用培養(yǎng)基做植物細胞組織培養(yǎng)條件選擇介紹

一 光照

光照強度對培養(yǎng)細胞的增殖和器官的分化有重要的影響,一般來說,光照強度較強,而光照強度較弱幼苗容易圖長.離體培養(yǎng)條件下常用蓋得光亮,一般為1000-4000勒克斯.離體培養(yǎng)中通常難達到4000勒克斯,一般光亮在2-3000勒克斯.光照強度的高低直接影響器官的分化頻率,高光亮可以降低植物體內(nèi)生長素水平,低光亮使植物體內(nèi)生長素水平較高,這個情況下容易生根.例如煙草和可可的體胚發(fā)生需要高強度的光照:龍巖的體胚發(fā)生需要需要黑暗條件,光照會嚴(yán)重抑制其發(fā)生,

光質(zhì)對愈傷組織誘導(dǎo),培養(yǎng)組織的增殖以及器官的分化都有明顯的影響.對苗再生zui有利的光譜是藍光區(qū),根的發(fā)生則是紅光區(qū).如在煙草髓部組織分化秒的培養(yǎng)中,起作用的主要是藍光區(qū),連接黑暗下,培養(yǎng)物停留在芽的分化,不能成苗:紅光能促進菊芋塊莖組織形成根;煙草花粉培養(yǎng)中,紅光和低光強的白光效果;但曼陀羅花藥培養(yǎng)中,紅光則抑制胚狀體形成.離體培養(yǎng)條件下,一般用日光燈進行光照,光譜成分組要是藍紫光,波長在419-467nm對芽分化有效光譜成分為藍紫光,根分化則受600-680nm所刺激.

光周期對植物細胞有脫分化和再分化的效應(yīng).離體培養(yǎng)中光周期的調(diào)節(jié)zui常用16小時光照,8小時黑暗,愈傷組織誘導(dǎo)節(jié)段,一般采用三種做法:全暗,周期性光照和散射型光照.依照植物種類不同,做法不同,大多數(shù)植物適合全暗或周期性光照.在器官發(fā)生階段,一般給予周期性光照比較好

二 溫度

大多數(shù)植物細胞培養(yǎng)都在23-27度之間進行,一般采用25正負2度環(huán)境.低于15度培養(yǎng)時,植物細胞會表現(xiàn)為生長停止,高于35度時對植物生長不利.但是,不同植物培養(yǎng)的室溫不同.溫度不經(jīng)影響植物細胞培養(yǎng)育苗的生長速度,也影響其分化增殖以及器官建成等發(fā)育進程.

三 濕度

冬季應(yīng)減少瓊脂的用量,否則將影響培養(yǎng)基感應(yīng).以致不利于外植體接觸或插進培養(yǎng)基,導(dǎo)致生長受阻.封口材料也直接影響容器內(nèi)濕度的情況,但封閉性較高的封口材料榮引起透氣性受阻,導(dǎo)致植物生長發(fā)育受影響.環(huán)境的相對濕度可以影響培養(yǎng)基的水分蒸發(fā),一般要求70-80%的相對濕度,常用加濕器或經(jīng)常灑水的方法來調(diào)節(jié)濕度.濕度過低會使培養(yǎng)基喪失大量水分,導(dǎo)致培養(yǎng)基成分濃度的改變和滲透壓的升高,進而影響組織培養(yǎng)的正常進行.濕度過高棉塞容易長霉造成污染.

四 PH值

不同的植物對培養(yǎng)基的PH值要求不同,大多在5-6.5左右,一般培養(yǎng)基為5,8.一般來說PH高于6.5時,培養(yǎng)基會變硬;培養(yǎng)基低于5時,瓊脂不能很好的凝固.在高溫滅菌時會降低PH大約在0.2-0.3.因此配制時一般要求高處0.2-0.3個單位.

五 滲透壓

培養(yǎng)基中有鹽類,蔗糖等化合物,因而影響滲透壓的變化.通常1-2個大氣壓對植物生長有促進作用,2個大氣壓以上對生長有阻礙作用,5-6個大氣壓會使植物組織停止生長,6個以上大氣壓細胞不能生存.甘露醇,山梨醇可以作為調(diào)節(jié)物質(zhì).

六 氣體

植物組織培養(yǎng)氧氣是必須的因素,瓶蓋附有濾氣膜的封口材料,固體培養(yǎng)基可加入活性炭來增加通氣度,以利于發(fā)根.培養(yǎng)室應(yīng)經(jīng)常換氣,改善培養(yǎng)室的通氣狀況.

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