免疫組化筆Pap Pen使用方法:
1. 新筆的筆尖上沒有油,*次使用時,須先把筆尖靠在玻璃上將筆筒往下輕壓(不能過重以防油過多流出),使得筆筒內(nèi)的油流出,濕潤筆尖,即可正常使用。
2. 石蠟組織切片的畫圈:切片脫蠟水化,PBS沖洗,甩干PBS液,在組織片周圍畫圈,油圈距離組織片邊緣2-3mm;在使用實驗用免疫組化筆畫線之前,先用吸水紙將切片周圍擦干。所畫的圈應(yīng)在室溫下干燥1-2分鐘后再進行下一步操作流程。如果需要使用胰蛋白酶或其它蛋白酶消化或者進行抗原熱修復(fù)處理切片,應(yīng)待這些步驟完成后再使用實驗用免疫組化筆。
3. 冰凍切片的畫圈:將載玻片清洗干凈,用防脫片劑(如Poly-L-Lysine或APES)防脫處理,切片、貼片,PBS浸洗組織片,甩干PBS液,在組織片周圍畫圈,畫圈距離組織邊緣2-3mm;在使用實驗用免疫組化筆畫線之前,先用吸水紙將切片周圍擦干。所畫的圈應(yīng)在室溫下干燥1-2分鐘后再進行下一步操作流程。如果需要使用胰蛋白酶或其它蛋白酶消化或者進行抗原熱修復(fù)處理切片,應(yīng)待這些步驟完成后再使用實驗用免疫組化筆。
4. 細胞培養(yǎng)皿培養(yǎng)玻片的畫圈:以PBS清洗培養(yǎng)皿內(nèi)培養(yǎng)玻片上的細胞后,傾去PBS緩沖液,用實驗用免疫組化筆直接畫于培養(yǎng)皿培養(yǎng)玻片的細胞培養(yǎng)面。在使用實驗用免疫組化筆畫線之前,先用吸水紙將切片周圍擦干。所畫的圈應(yīng)在室溫下干燥1-2分鐘后再進行下一步操作流程。一次性細胞培養(yǎng)皿染色結(jié)束后不宜用二甲苯透明(可重復(fù)使用的玻璃材質(zhì)的培養(yǎng)皿或玻璃材質(zhì)的培養(yǎng)玻片可以),可用甘油類或水溶性封片劑直接滴加于染色的細胞上,再行封片。
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