ELISAFLAG融合蛋白純化技術(shù)的提高
自從20世紀(jì)70年代中期融合標(biāo)簽技術(shù)出現(xiàn)以來,親和標(biāo)簽已成為一種重組蛋白純化十分有效的工具,具有結(jié)合特異性高、純化條件溫和、純化步驟簡(jiǎn)便、適用性廣泛等顯著優(yōu)勢(shì)。通常,親和標(biāo)簽定義為對(duì)特定的生物或化學(xué)配基具有高度親和力的一段氨基酸序列,可以分成很多類,其中一個(gè)常用的小分子短肽標(biāo)簽是FLAG標(biāo)簽。
通常,F(xiàn)LAG標(biāo)簽系統(tǒng)使用合成的FLAG短肽在非變性條件下進(jìn)行融合蛋白的洗脫,從而保證了ELISA融合蛋白的生物活性。然而,F(xiàn)LAG短肽合成成本較高,不適用于大規(guī)模純化,且需要額外步驟除去結(jié)合在層析介質(zhì)上的短肽。
ELISA方法改進(jìn):
為此,我們進(jìn)行了以下改進(jìn):
(1)改用精氨酸在偏酸條件下進(jìn)行FLAG融合蛋白的洗脫,不僅純化*,而且大大降低了純化成本,簡(jiǎn)化了純化步驟。
(2)結(jié)合一個(gè)接頭結(jié)構(gòu)的3*FLAG標(biāo)簽,這種標(biāo)簽天然親水,因而不會(huì)改變?nèi)诤系鞍椎墓δ?,遮蓋融合蛋白的其他表位,或者降低融合蛋白的可溶性,尤其合適于某些需要維持生物活性的小分子目標(biāo)蛋白。
111524-200503 木香烴內(nèi)酯 對(duì)照品 含量測(cè)定 20mg
111525-200404 去氫木香內(nèi)酯 對(duì)照品 鑒別 20mg
111528-200504 蒙花苷 對(duì)照品 含量測(cè)定 20mg
111529-200302 五味子酯甲 對(duì)照品 鑒別 20mg
111530-200505 毛蕊花糖苷(麥角甾苷) 對(duì)照品 含量測(cè)定 20mg
111531-200001 毛兩面針?biāo)?對(duì)照品 鑒別 20mg
111532-200202 巖白菜素 對(duì)照品 鑒別 50mg
ELISA111533-200403 高三尖杉酯堿 對(duì)照品 鑒別 20mg
111534-200202 紫杉醇 對(duì)照品 含量測(cè)定 20mg
111535-200502 白藜蘆醇 對(duì)照品 含量測(cè)定 20mg
111536-200304 土貝母苷甲 對(duì)照品 鑒別 20mg
111537-200501 松脂醇二葡萄糖苷 對(duì)照品 含量測(cè)定 20mg
111538-200403 槲皮苷 對(duì)照品 含量測(cè)定 20mg
111539-200001 薯蕷皂苷元 對(duì)照品 含量測(cè)定 20mg
相關(guān)產(chǎn)品
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