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          Dxy_ PIERCE MAGNETIC RNA PULL-DOWN KIT, 20 RXNS

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          科學儀器

            Thermo Scientific Pierce 磁性 RNA-蛋白沉降試劑盒為研究人員提供了一種簡化、穩(wěn)健的方法,使用末端標記 RNA 作為誘餌來富集蛋白-RNA 相互作用。

            磁性 RNA-蛋白沉降試劑盒的特征:

            ?直接 – 使用末端標記 RNA 直接捕獲核糖核蛋白復合物;沉降時不使用或不需要抗體
            ?易于使用– 富集 RBP 時不需要使用離心杯或離心;簡化了程序,完成 RNA 標記反應(yīng)后僅需極少的手動操作時間(小于 3 小時)
            ?靈活– 使用體外轉(zhuǎn)錄 RNA 或合成 RNA 標記各種長度和復雜性;使用內(nèi)源性、過表達和體外翻譯裂解物成功富集的蛋白
            ?特異性– 磁珠背景噪音低;無關(guān) RNA 或突變 RNA 不會顯著影響特定 RBP 的富集
            ?經(jīng)濟– 單獨購買商業(yè)合成的末端標記 RNA、磁珠和試劑
            ?全套– 含有標記模塊和富集模塊,模塊中帶有檢測所需的緩沖液;包括陽性對照 RNA、陰性對照 RNA 以及 RBP 抗體

            磁性 RNA-蛋白沉降試劑盒提供了使用以脫硫末端標記的 RNA 高效富集 RNA 結(jié)合蛋白 (RBP) 的試劑以及親和素磁珠。全套試劑盒中包含的試劑足夠進行 20 次 RNA 標記反應(yīng)和 20 次蛋白-RNA 沉降分析。這種直接富集蛋白-RNA 交互體的方法可以替代蛋白-RNA 復合體或核酸嵌入蛋白的抗體捕獲法。本試劑盒的另一個優(yōu)點是,它為標記反應(yīng)和 pull-down 分析均提供了經(jīng)驗證的質(zhì)控品。該試劑盒適于進行多種下游應(yīng)用,包括 Western 印跡和質(zhì)譜 (MS)。

            包括:
            全套試劑盒中包含 Pierce RNA 3'-端脫硫化試劑盒、陽性和陰性 RNA 對照品、核酸兼容性親和素磁珠以及 RBP 富集和洗脫緩沖液

            需要:
            用戶提供的 RNA 和裂解物(實驗樣品)

            應(yīng)用:
            ? 突變分析
            ? 結(jié)構(gòu)功能分析
            ? RNA 與蛋白相互作用的鑒別
            ? 未知 RNA 與蛋白結(jié)合對或復合物的 MS 分析

            使用標記 RNA 作為誘餌來富集 RNA-結(jié)合蛋白優(yōu)于抗體富集,因為其直接捕獲相互作用。本試劑盒中包括 Pierce RNA 3'-末端脫硫化試劑盒,其使用 T4 RNA 連接酶將單個胞苷二磷酸核苷酸連接至單鏈 RNA 的 3'-末端。脫硫既可用作檢測靶標,也可用作可洗脫親和柄。核苷酸與脫硫之間的間隔臂長度已經(jīng)過優(yōu)化處理,可高效連接至微珠上,而不會阻礙 RNA 與蛋白的結(jié)合。

            RNA 結(jié)合蛋白富集的程序已經(jīng)過優(yōu)化,易于使用。先將標記好的 RNA 捕獲到微珠上,以作好結(jié)合蛋白的準備。將結(jié)合了 RNA 的微珠放入蛋白 RNA 結(jié)合緩沖液中進行平衡,然后加入蛋白裂解物。洗滌后,可使用非變性洗脫緩沖液或 SDS-PAGE 上樣緩沖液洗脫樣品。


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