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詳細(xì)介紹
操作程序
- 加樣反應(yīng)：取出所需量的反應(yīng)板條，每孔加樣本稀釋液（5號(hào)液）2滴，再分別加入待檢的血清樣本10ul，混勻。同時(shí)設(shè)陰性、陽性及空白對照各一孔；陰性、陽性對照不用再稀釋，直接加樣100ul即可，空白對照孔僅加入樣本稀釋液（5號(hào)液）2滴。37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體，每孔加洗滌液（2號(hào)液）1滴，立即用蒸餾水注滿，靜置30秒后甩去，再直接用蒸餾水洗滌四次，甩去，拍干。
- 加酶反應(yīng)：除空白對照孔外其余每孔加酶結(jié)合物（1號(hào)液）2滴，37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體，如上洗滌，拍干。
- 顯色反應(yīng)：加底物（3號(hào)液）和顯色劑（4號(hào)液）各1滴，混勻，37℃下避光顯色10分鐘。加終止液（6號(hào)液）1滴，混勻，終止反應(yīng)（加終止液后藍(lán)色會(huì)變?yōu)辄S色）并判讀結(jié)果。
結(jié)果判斷
- 肉眼觀察：陰性對照接近無色，陽性對照呈明顯黃色，表示試驗(yàn)有效。待檢孔接近無色表示該標(biāo)本為陰性，待檢孔呈明顯黃色表示該標(biāo)本為陽性。
- 儀器判斷：以空白對照調(diào)零用酶標(biāo)儀于450nm（620nm作參比波長）讀取O.D值，待檢孔O.D值大于陰性對照2.1倍者為陽性。當(dāng)陰性對照O.D值低于0.05時(shí)按0.05計(jì)算。
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