河豚毒素檢測試劑盒說明書

     本測試盒用直接競爭免疫分析法定量測定河豚魚中的河豚毒素（TTX）。該測試盒反應(yīng)孔可拆卸，可測單份樣品，也可測多份樣品。定量分析時需有含450nm波長的微孔板酶標(biāo)儀。
1.概要
     河豚魚是近海底棲居的肉食性有毒海產(chǎn)魚類，其內(nèi)臟有劇毒。其毒性物質(zhì)主要是河豚毒素，河豚毒素是一種劇烈的神經(jīng)毒素，其性質(zhì)穩(wěn)定，加熱、鹽腌及高溫烹煮均不能使其破壞，其毒性比氰化鈉大1000倍。因誤食或食用加工不當(dāng)?shù)暮与圄~而發(fā)生人畜中毒的事件每年都有發(fā)生。故準(zhǔn)確檢測河豚魚中的河豚毒素對預(yù)防和控制河豚毒素中毒，具有重要意義。本檢測方法具有靈敏、快速、簡便、特異性好、取樣量小、不破壞魚體結(jié)構(gòu)，并可同時檢測大量樣品等優(yōu)點。

 2 測定原理

     本測試盒利用固相酶聯(lián)免疫吸附原理，采用直接競爭ELISA法進(jìn)行測定。用抗原包被微孔板，加入河豚毒素標(biāo)準(zhǔn)品或樣品、抗河豚毒素酶標(biāo)單克隆抗體進(jìn)行免疫反應(yīng)后，加入底物顯色，終止液終止后，用酶標(biāo)儀在450nm處測定OD值。

3 提供的物品

微孔板

5個濃度的TTX標(biāo)準(zhǔn)溶液（各1mL）

標(biāo)準(zhǔn)1：0ng/mL    ……………………………………………………………直接使用

標(biāo)準(zhǔn)2：5.0ng/mL ……………………………………………………………直接使用

標(biāo)準(zhǔn)3：20.0ng/mL       ………………………………………………………直接使用

標(biāo)準(zhǔn)4：50.0ng/mL       ………………………………………………………直接使用

標(biāo)準(zhǔn)5：200.0ng/mL     ………………………………………………………直接使用

抗TTX抗體溶液（6mL）       ………………………………………………………直接使用

顯色液（12mL）       …………………………………………………………………直接使用

終止液（6mL）  ………………………………………………………………………直接使用

濃縮洗液（30mL）   …………………………………………………………………稀釋使用

4 盒中未提供，需自備物品

微孔板酶標(biāo)儀（含450nm）、振蕩器、粉碎機、微量移液器

量筒、漏斗、容量瓶、快速定性濾紙

乙酸、甲醇（分析純）、去離子水或蒸餾水

5 操作者注意事項

標(biāo)準(zhǔn)溶液中含有TTX毒素，應(yīng)特別小心。

終止液為1N硫酸，避免接觸皮膚。

每次加樣后立即將所有試劑放回2~8 ℃。

每步加樣時間應(yīng)控制在5min內(nèi)。

孵育過程中應(yīng)避光。

不要使用過期試劑盒。

不要交叉使用不同批號的試劑盒中的試劑。

6 儲存條件

       保存試劑盒于2~8℃。不要冷凍

       顯色液對光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。

       將不用的微孔板放進(jìn)原鋁箔袋中，置2~8℃保存。

 7 試劑變質(zhì)的標(biāo)志

      標(biāo)準(zhǔn)1的吸光度值小于0.5個單位（A450nm<0.5）時，表示試劑可能變質(zhì)。