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產(chǎn)品簡介
美國BinaxNOW瘧原蟲抗原檢測卡是體外免疫層析試驗，用于定性檢測具有瘧疾癥狀和體征人群EDTA抗凝靜脈血或毛細血管血中的惡性瘧原蟲抗原和間日瘧原蟲抗原，可對惡性瘧原蟲，間日瘧原蟲做出輔助診斷，并可對惡性瘧原蟲和間日瘧原蟲做出鑒別診斷。
詳細介紹
美國BinaxNOW瘧原蟲抗原檢測卡
瘧疾(Malaria)是瘧原蟲寄生于人體所引起的傳染病。經(jīng)瘧蚊叮咬或輸入帶瘧原蟲者的血液而感染。不同的瘧原蟲分別引起間日瘧、三日瘧、惡性瘧及卵圓瘧。本病主要表現(xiàn)為周期性規(guī)律發(fā)作，全身發(fā)冷、發(fā)熱、多汗，長期多次發(fā)作后，可引起貧血和脾腫大。兒童發(fā)病率高，大都于夏秋季節(jié)流行。瘧疾流行于102個國家和地區(qū)，特別是在非洲、東南亞和中、南美洲的一些國家，惡性瘧死亡率*。
BinaxNOW瘧疾快速檢測試劑是美國*一個獲FDA注冊的瘧疾快速診斷試劑產(chǎn)品；是中國到目前為止*一個獲得SFDA注冊的瘧疾快速診斷試劑；獲得進入歐盟市場的準入資格，并且獲WHO認證瘧疾快速檢測試劑。
產(chǎn)品名稱：
通用名稱：瘧原蟲抗原檢測試劑盒（膠體金法）
英文名稱：Binax NOW® Malaria Test
包裝規(guī)格
25人份/盒
預(yù)期用途
瘧原蟲抗原檢測試劑盒（膠體金法）是體外免疫層析試驗，用于定性檢測具有瘧疾癥狀和體征人群EDTA抗凝靜脈血或毛細血管血中的惡性瘧原蟲抗原和間日瘧原蟲抗原，可對惡性瘧原蟲，間日瘧原蟲做出輔助診斷，并可對惡性瘧原蟲和間日瘧原蟲做出鑒別診斷。
該試驗不用于無癥狀人群的篩查。
檢驗原理
瘧原蟲抗原檢測試劑盒（膠體金法）使用的是薄膜免疫層析技術(shù)，該技術(shù)用單克隆抗體檢測靜脈血和末梢血中的惡性瘧原蟲抗原和間日瘧原蟲抗原，這兩種抗體與對照抗體固定到膜支持物上形成三條不同的線，膜支持物與樣品墊相連，結(jié)合有可視粒子的對照抗體和抗瘧原蟲抗體浸滲在樣品墊上，組成檢測條。檢測條位于一塊書形鉸鏈狀的檢測卡中，與沖洗墊和吸收墊一道參與檢測板閉合后薄膜的清洗。
檢測時，將全血加到樣品墊上，標本中存在的瘧原蟲抗原與抗瘧原蟲抗體結(jié)合物結(jié)合。將A試劑液加到檢測條的底部，使抗原結(jié)合物復(fù)合物沿檢測條流動，在固定抗體處被捕獲，形成檢測線，固定的對照抗體捕獲對照結(jié)合物，形成對照線。一旦血標本流過檢測條，就將檢測板閉合，使加到?jīng)_洗墊中的A試劑把檢測條上多余的血液沖去。
檢驗結(jié)果可用紫紅色線的存在與否來解釋。15分鐘讀數(shù)時，陽性結(jié)果將包括一條檢測線（或兩條檢測線）和一條對照線，陰性結(jié)果只產(chǎn)生一條對照線，陰性表明標本中未檢出瘧原蟲抗原。如果不出現(xiàn)對照線，不管檢測線出現(xiàn)與否，結(jié)果都為無效。
主要組成成份
1．檢測卡
| 檢測卡 | 組分 |
| 捕獲線（T1）抗體 | HRPII 捕獲抗體 |
| 捕獲線（T1）結(jié)合物 | 金標記的抗HRPII抗體 |
| 捕獲線（T2）抗體 | 抗醛縮酶IgG |
| 捕獲線（T2）結(jié)合物 | 金標記的抗醛縮酶 |
| 質(zhì)控線捕獲抗體 | 雞IgY |
| 質(zhì)控線結(jié)合物 | 結(jié)合金顆粒的驢抗雞IgY |
2．A試劑：含去污劑和疊氮鈉的Tris緩沖液。
3。毛細管：EDTA抗凝毛細管，用于將末梢全血加入到檢測卡中。
自備材料
采血針，滅菌拭子或棉球，時鐘，秒表或跑表
注：加樣時，要使用能加樣15μL體積的經(jīng)過校準的加樣器。
儲存條件及有效期
試劑盒在2-37度貯藏。
試劑有效期為自生產(chǎn)之日起24個月。
試劑在滿足貯藏條件的情況下可穩(wěn)定使用至效期（效期標注在外包裝和試劑盒內(nèi)）結(jié)束。
樣本要求
EDTA抗凝的新鮮全血。手指血要立即測試，靜脈血可于2-30度保存3天，但測試前須平衡至室溫（15-30度），并*混勻。
檢驗方法
樣本采集和處理：
用標準的靜脈血采集程序采集靜脈血，注入EDTA抗凝管中。全血樣品采集后要盡快測試，如果不能馬上進行操作，可將血液在2-30度保存3天。如果血液被冷藏，測試前將之平衡至室溫（15-30度），并輕輕混勻。
手指穿刺留取毛細血管血時，用無菌拭子或紗巾將采血區(qū)擦凈，風干，用采血針刺破皮膚，把血液直接收集在EDTA毛細管中，注滿，立即使用。
檢測前確保所有標本都平衡至室溫。
檢測步驟：
檢測前從包裝代中取出檢測板。打開包裝，把它平放在工作臺面上。
1．如果使用毛細血管血，慢慢將微量毛細管中的血液加到檢測板右側(cè)的整個紫色樣品墊上。加樣時將毛細管垂直持放，在樣品墊的幾個部位加樣，一旦樣品墊達到飽和，就可將毛細管丟棄處理，本試驗未必需要毛細管中收集的全部血液。到步驟2。
如果使用的是靜脈血標本，用加樣頭在血液中吸排幾次，然后慢慢加入15μL血液，打到紫色樣品墊上。到步驟2。
重要提示：加樣不正確可導(dǎo)致結(jié)果無效或結(jié)果無法解釋。
2．緊靠紫色樣品墊的下邊有一個白色墊，垂直加2滴A試劑到白色墊上，第2滴須在*滴被墊吸收后方可加入。不要把A試劑直接加在紫色墊上。
3．讓血標本流經(jīng)整個檢測條，但不要使血液溢出或低于檢測條上部的吸收墊，因為這樣會影響檢測條的*沖洗效果。
注意：如果1分鐘后檢測條上的血流阻斷或流動不到條的1/2，可再加一滴A試劑到檢測條下部的白墊上（位于加血的標本墊下方）
4．在血標本到達檢測條上部的白色吸收墊底部前，慢慢向檢測板左上方的沖洗墊中加入4滴A試劑，當前一滴吸收后，才能加下一滴。注意：第三滴和第四滴可能不能被*吸收。
5當標本到達檢測條上部白色吸收墊底部的時候，從檢測板右邊將粘附襯揭去，閉合檢測板。這可使A試劑將血標本從檢測條上沖去。為確保檢測板閉合良好，試驗流暢，用力按壓結(jié)果窗口的右邊緣。
6.閉合檢測板15分鐘后從視窗中讀取結(jié)果。不足15分鐘或大于15分鐘讀取的結(jié)果可能不正確。
注：讀結(jié)果時，如有必要可將檢測板傾斜以減輕結(jié)果窗口中耀眼的光線。
參考值（參考范圍）
對惡性瘧原蟲的zui低檢測限是1001-1500個寄生蟲/微升。
對間日瘧原蟲的zui低檢測限是5001-5500個寄生蟲/微升。
檢驗結(jié)果的解釋
對照線（C）會出現(xiàn)在所有有效試驗中，當存在對照線時，試驗結(jié)果可如下解釋。注：出現(xiàn)的任意檢測線，即使顏色非常淺淡，也解釋為陽性結(jié)果。
有效試驗結(jié)果
對照線（C）會出現(xiàn)在所有有效試驗中，當存在對照線時，試驗結(jié)查可如下解釋。注：出現(xiàn)的任意檢測線，即使顏色非常淺淡，也解釋為陽性結(jié)果。
無效和/或無法解釋的試驗結(jié)果
如果對照線不出現(xiàn)，不管檢測線出現(xiàn)與否結(jié)果都是無效的。
15分鐘時，如果背景色妨礙讀數(shù)，結(jié)果無法解釋，標本或A試劑的加入方法不正確可導(dǎo)致試驗無效或試驗結(jié)果無法解決，請與技術(shù)部門。
檢驗方法的局限性
陰性試驗結(jié)果不能排除瘧疾感染，特別是寄生物在低水平時，因此，用Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒獲得的結(jié)果必須與其它化驗結(jié)果和臨床檢查相結(jié)合以做出準確診斷。這一點在顯微鏡檢查中經(jīng)常用到，再收集一份標本，再測一次。
Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒既可檢測活瘧原也可檢測死瘧原蟲抗原，包括配子細胞4和隨后產(chǎn)生的裂殖體5。檢測依賴于標本中的抗原載量，可能與顯微鏡對同一份標本的檢查無直接相關(guān)性。
Binax NOW® 瘧原蟲抗原檢測試劑盒尚不能用于監(jiān)測瘧疾的治療效果，因為用抗瘧疾藥物將瘧原蟲殺滅后幾天內(nèi)仍可檢出瘧原蟲抗原4。
類風濕因子陽性的標本在Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒中可能出現(xiàn)假陽性。類風濕因子是一種自身抗體，類風濕因子女陽性與急性自身免疫病，如類風溫性關(guān)節(jié)炎，慢性病毒性感染（如，病毒性肝炎），寄生蟲感染有關(guān)6。此外，在正常人群中有1-4%的人類風濕因子陽性7。同其它瘧原蟲抗原快速檢測試驗一樣，Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒對類風濕因子陽性個體標本也產(chǎn)生假陽性（見操作特性部分）。
該試驗不用于無癥狀人群的篩查。
產(chǎn)品性能指標
預(yù)期值
瘧疾是一種嚴重的寄生蟲病，是熱帶亞熱帶地區(qū)危害分健康的主要因素之一。瘧原蟲的陽性檢出率受多種因素影響，包括標本采集方法，檢驗手段，地理位置和疾病在特定區(qū)域流行性。惡性瘧原蟲感染被認為是zui兇險的，而間日瘧原蟲很少有致命性。
2011年，在瘧疾地方流行區(qū)域進行了一項臨床研究。在有癥病人中，惡性瘧疾（用顯微鏡檢查進行了確定）平均占14%，間日瘧疾平均占29%，惡性瘧與間日瘧的混合感染占的比例非常低。
2005-2006年在美國東部進行了一項多層研究，從發(fā)熱和有發(fā)熱史的住院和門診病人（這些病人住在很少發(fā)生瘧疾的地區(qū)，被看作是瘧原蟲陰性病人）中收集體了217份全血標本，用Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒進行檢測，結(jié)果216（99.5%）人陰性。
美國BinaxNOW瘧原蟲抗原檢測卡
操作特性
臨床標本特性- Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒敏感性和特異性-地方流行人群：
2001年在美國國瘧原蟲流行地區(qū)進行了一個多中心前瞻性研究，研究中將Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒與吉姆染色顯微鏡技術(shù)進行了比較。從帶有瘧原蟲樣癥狀的病毒人中采集了4122份全血標本用Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒評價。由于瘧原蟲的無性形式（非配子體）表示有大感染，因此，顯微鏡檢測只有檢查到瘧原蟲的無性形式才能視為陽性。
測試人群中44%的人（1796/4122）用顯微鏡檢查為瘧疾陽性，其中有557個病人為惡性瘧，1187個人為間日瘧，34個人為惡性瘧/間日瘧混合感染。59%的人為男性，41%的人為女性。19%的人為兒童，81%的人為***。Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒對單種瘧原蟲和惡性瘧/間日瘧混合感染的性能概述如下。
Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒的試驗性能在病人的年齡和性別方面沒有差異，Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒對惡性瘧的特異性在5%接受過抗瘧藥物治療的病人中（89.4%）較之未治療的病人（94.4%）有少許下降，但無統(tǒng)計學(xué)差異。
在整個研究人群中，Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒對低紅細胞壓積和高紅細胞壓積樣本的試驗性能是等同的。
對惡性瘧原蟲感染的檢測
Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒和顯微鏡檢查對惡性瘧原蟲的敏感性和特異性情況如下所示。對敏感性的評價基于顯微鏡檢查中觀察到的寄生物血癥水平（每微升的寄生蟲量）。
Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒與顯微鏡檢查在惡性瘧原蟲敏感性和特異性方面的比較
惡性瘧的敏感性
寄生物血癥水平 | 敏感性% | 95%可信區(qū)間 |
>5000 | 99.7%(326/327) | 98-* |
1000-5000 | 99.2%(126/127) | 96-* |
500-1000 | 92.6%(25/27) | 76-99% |
100-500 | 89.2%(33/37) | 75-97% |
0-100 | 53.9%(21/39) | 37-70% |
總計 | 95.3%(531/557) | 93-97% |
惡性瘧的特異性
特異性% | 95%可信區(qū)間 |
94.2%(3297/3500) | 93-95% |
間日瘧原蟲感染的檢測
Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒和顯微鏡檢查對間日瘧原蟲的敏感性和特異性情況如下所示.。對敏感性的評價基于顯微鏡檢查中觀察到的寄生物血癥水平（每微升的寄生蟲量）。有68份標本顯微鏡檢查僅間日瘧原蟲陽性，用Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒檢查卻出現(xiàn)了兩條檢測線。如果這些結(jié)果也記錄在陽性之列，Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒對間日瘧原蟲測定的總敏感性從98.9%提高到74.6%（886/1,187）。
對間日瘧原蟲的敏感性
寄生物血癥水平 | 敏感性% | 95%可信區(qū)間 |
>5000 | 93.5%（462/494） | 91-96% |
1000-5000 | 81.0%（277/342） | 76-85% |
500-1000 | 47.4%（37/78） | 36-59% |
100-500 | 23.6%（34/144） | 17-31% |
0-100 | 6.2%（8/129） | 3-12% |
總計 | 68.9%（818/1187） | 66-72% |
對間日瘧原蟲的特工異性
特異性% | 95%可信區(qū)間 |
99.8%（2863/2870） | 99-* |
惡性瘧和間日瘧的檢測限：
在上述研究中，經(jīng)確定Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒對惡性瘧的臨床檢測限（LOD）（定義為95%的檢測次數(shù)產(chǎn)生陽性結(jié)盟查的寄生蟲血癥水平）為1001-1500個寄生蟲/微升，對間瘧的檢出限為5001-5500個寄生蟲/微升。
樣品的臨床性能-Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒在流行人群中對指血和靜脈血的敏感性和特異性：
2003年在美國國外瘧疾流行區(qū)域進行了一項前瞻性研究，該研究用靜脈血和指血對Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒的性能與吉姆薩顯微鏡法進行了比較。 Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒評估的全血采自787位有瘧疾癥狀的病人的靜脈血和指尖。由于無性體（非配子體）表示有感染，顯微鏡檢查只有查到無性體方可視為陽性。
用Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒和顯微鏡法對782份靜脈血標本和784份指尖血標本進行分析，Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒相對顯微鏡法對惡性瘧和間日瘧的敏感性和特異性如下：
與顯微鏡法相比，Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒對靜脈血和指尖血中惡性瘧和間日瘧的敏感性和特異性
靜脈血標本 | ||||
敏感性% | 95%可信區(qū)間 | 特異性% | 95%可信區(qū)間 | |
惡性瘧 | *（81/81） | 96-* | 94.7%（664/701） | 93-96% |
間日瘧 | 81.6%（102/125） | 74-87% | 99.7%（655/957） | 99-* |
敏感性% | 95%可信區(qū)間 | 特異性% | 95%可信區(qū)間 | |
惡性瘧 | 98.8%（82/83） | 94-* | 90.4%（634/701） | 88-92% |
間日瘧 | 80.6%（104/129） | 73-87% | 99.5%（652/655） | 99-* |
樣本的臨床特性- Binax NOW®瘧疾試驗特異性-非流行人群
2006-2007年在美國東部進行了一項前瞻性研究，該研究對Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒的性能與吉姆染色鏡檢進行了比較。對100份取自發(fā)熱病人的血標本用Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒和顯微鏡法進行了評估。100份樣品中，顯微鏡檢查結(jié)果全為陰性，Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒中99例陰性，特異性為99%（99/100）。與顯微鏡法相比，Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒的特異性如下：
-/- | +/- | 特異性% | 95%可信區(qū)間 | |
惡性瘧 | 100 | 0 | * | 96-* |
間日瘧 | 99 | 0 | 99% | 95-* |
分析反應(yīng)性：
兩種感染人體的瘧原蟲（惡性瘧原蟲，間日瘧原蟲）在下列濃度時在Binax NOW®瘧原蟲抗原檢測試劑盒中檢測陽性。
種類 | 每微升全血中寄生蟲濃度 |
惡性瘧原蟲 | 310 |
間日瘧原蟲 | 50-500 |
分析特異性（交叉反應(yīng)性）
為了確定Binax NOW®瘧原蟲抗體檢測試劑盒的分析特異性，對28種血中可能存在的病原微生物（7種細菌，5種原生生物，16種病毒）進行了檢測。在下列濃度時檢測全為陰性。
| 類型 | 檢測病原 | 檢測濃度 |
| 細菌 | 伯氏疏螺旋菌 | 2.3×106個微生物/ml |
| 問號鉤端螺旋體 | 1.0×107個微生物/ml | |
| 雙曲鉤端螺旋體 | 1.0×107個微生物/ml | |
| 梅毒螺旋體 | 1.0×105個微生物/ml | |
| 康諾爾立克次體 | 1.0×107個微生物/ml | |
| 地方性斑疹傷寒立克次體 | 1.0×107個微生物/ml | |
| 恙蟲立克次體 | 1.0×107個微生物/ml | |
| 原生生物 | 鼠源巴貝斯原蟲 | 4.4×107個寄生蟲/ml |
| 庫魯茲椎體寄生蟲 | 1.3×106個寄生蟲/ml | |
| 杜氏利什曼原蟲 | 1.0×106個寄生蟲/ml | |
| 嬰兒利什曼原蟲 | 1.0×106個寄生蟲/ml | |
| 恰加斯利利什曼原蟲 | 1.0×106個寄生蟲/ml | |
| 病毒 | 巨細胞病毒 | 1.2×105PFU/ml |
| EB病毒 | 1.1×105拷貝/ml | |
| 登革病毒-West Pac 74 | 1.2×105PFU/ml | |
| 登革病毒-S16803 | 3.9×104PFU/ml | |
| 登革病毒-CH3489 | 1.3×105PFU/ml | |
| 登革病毒-TVP360 | 1.4×105PFU/ml | |
| 黃熱病毒 | 7.9×106PFU/ml | |
| 西尼羅河病毒 | 1.6×105PFU/ml | |
| 基孔肯雅病毒 | 4.0×105PFU/ml | |
| 羅斯河病毒 | 1.0×106PFU/ml | |
| 甲型流感-Bayem/7/95 | 2.5×107PFU/ml | |
| 乙型流感-維多利亞/2/87 | 1.0×107PFU/ml | |
| HIV-1（B亞型） | 1.4×105PFU/ml | |
| 乙肝病毒 | 2.0×105PFU/ml | |
| 丙肝病毒 | 1.9×105PFU/ml | |
| 風疹病毒 | ≥2.0×102TCID50/ml |
來自血液外源成分的干擾
下列物質(zhì)可為人為引入血液中，用Binax NOW®瘧原蟲抗體檢測試劑盒進行評估，在下列濃度時未發(fā)現(xiàn)對試驗性能造成影響。注：這些藥物Binax NOW®瘧原蟲抗體檢測試劑盒的分析效應(yīng)是通過采集全血，加入高治療濃度量藥物，然后再對這些樣品進行檢測而進行研究的。這些藥品的代謝物對試驗的影響未進行研究。
| 物質(zhì)類型 | 物質(zhì) | 濃度 |
| 抗瘧藥（預(yù)防） | 甲氟喹 | 1mg/ml |
| 強力霉素* | 1mg/ml | |
| 氯喹 | 1mg/ml | |
| 羥化氯喹 | 1mg/ml | |
| 百樂君 | 1mg/ml | |
| 首奎 | 1mg/ml | |
| 奎寧 | 1mg/ml | |
| 黃胺和乙胺嘧*** | 1mg/ml | |
| 抗生素（治療） | 阿莫西林 | 0.1mg/ml |
| 頭孢氨芐 | 0.1mg/ml | |
| 環(huán)丙沙星 | 0.1mg/ml | |
| 紅霉素 | 0.1mg/ml | |
| 抗炎藥（治療） | 阿司匹林 | 1mg/ml |
| 醋氨酚 | 1mg/ml | |
| 布洛芬 | 1mg/ml |
*強力霉素也用作抗菌素，用量通常比本測試研究要低的多。
血液內(nèi)源性成分的干擾
根據(jù)CLSI EP7導(dǎo)則，對高水平的血液中的內(nèi)源性成分可能對Binax NOW®瘧原蟲抗體檢測試劑盒造成的干擾進行評估。對EDTA抗凝全血中高于生理水平的血紅蛋白、蛋白、血紅素（結(jié)合型和未結(jié)合型）和甘油三酯進行了測試，所有這些血液內(nèi)源性成分均未對試驗性能造成影響。