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當(dāng)前位置:研域(上海)化學(xué)試劑有限公司>>技術(shù)文章>>在細(xì)胞培育中怎么消除組織培育的污染呢?
當(dāng)重要的培育污染時,研究者可能企圖消除或控制污染。首要,確定污染物是細(xì)菌、真菌、支原體或酵母,把污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔脫離,用試驗室消毒劑消毒培育器皿和超凈臺,檢查HEPA過濾器。 高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對一些細(xì)胞系,因而,做劑量反應(yīng)試驗確定抗生素和抗霉菌素發(fā)生的劑量水平。下面是我司推薦的確定水平和消除培育污染的試驗過程:
?1. 在無抗生素的培育基中消化、計數(shù)和稀釋細(xì)胞,稀釋到慣例細(xì)胞傳代的濃度。
2. 渙散細(xì)胞懸液到多孔培育板中,或幾個小培育瓶中。在一個濃度梯度范圍內(nèi),把選擇抗生素加入到每一個孔中。
3. 每天觀測細(xì)胞目標(biāo),如脫落,出現(xiàn)空泡,匯合度下降和變圓。
4. 確定抗生素水平后,使用低于濃度2~3倍濃度的抗生素的培育液培育細(xì)胞2~3代。
5. 在無抗生素的培育基中培育細(xì)胞一代。
6. 重復(fù)過程4。
7. 在無抗生素的培育基中培育4~6代,確定污染是否以已被消除。
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