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        1. 研域(上海)化學(xué)試劑有限公司
          中級會(huì)員 | 第17年

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          食品農(nóng)殘檢測
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          在細(xì)胞培育中怎么消除組織培育的污染呢?

          時(shí)間:2019/9/19閱讀:1314
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          當(dāng)重要的培育污染時(shí),研究者可能企圖消除或控制污染。首要,確定污染物是細(xì)菌、真菌、支原體或酵母,把污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔脫離,用試驗(yàn)室消毒劑消毒培育器皿和超凈臺,檢查HEPA過濾器。 高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對一些細(xì)胞系,因而,做劑量反應(yīng)試驗(yàn)確定抗生素和抗霉菌素發(fā)生的劑量水平。下面是我司推薦的確定水平和消除培育污染的試驗(yàn)過程: 

           

          ?1. 在無抗生素的培育基中消化、計(jì)數(shù)和稀釋細(xì)胞,稀釋到慣例細(xì)胞傳代的濃度。 

           

          2. 渙散細(xì)胞懸液到多孔培育板中,或幾個(gè)小培育瓶中。在一個(gè)濃度梯度范圍內(nèi),把選擇抗生素加入到每一個(gè)孔中。

           

          3. 每天觀測細(xì)胞目標(biāo),如脫落,出現(xiàn)空泡,匯合度下降和變圓。 

           

          4. 確定抗生素水平后,使用低于濃度2~3倍濃度的抗生素的培育液培育細(xì)胞2~3代。 

           

          5. 在無抗生素的培育基中培育細(xì)胞一代。 

           

          6. 重復(fù)過程4。 

           

          7. 在無抗生素的培育基中培育4~6代,確定污染是否以已被消除。

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