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當(dāng)前位置:研域(上海)化學(xué)試劑有限公司>>技術(shù)文章>>研域小講堂:該怎樣挑選適宜的HA標(biāo)簽抗體?
HA標(biāo)簽可位于蛋白質(zhì)的C端或N端,該系統(tǒng)已廣泛使用于多種細(xì)胞類型,相應(yīng)的HA標(biāo)簽抗體也被廣泛使用。HA 標(biāo)簽抗體能特異識(shí)別C結(jié)尾或N結(jié)尾帶有HA標(biāo)簽(HA-tagged)的交融蛋白,也能夠用于檢測(cè)和HA tag交融表達(dá)蛋白的表達(dá)、細(xì)胞內(nèi)ding位,以及純化、定性或定量檢測(cè)HA tag交融表達(dá)蛋白等。
挑選適宜HA標(biāo)簽抗體需求考慮的要素
我們?cè)谔暨x一個(gè)標(biāo)簽抗體時(shí),首要根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)使用上的需求。這兒需求考慮的要素包含,HA抗體的使用檢測(cè)類型、HA抗體的克隆性及制備來(lái)歷等。比方該HA抗體是否能用于免疫熒光IF的檢測(cè)?是否能夠用于Western Bloting和免疫沉淀IP實(shí)驗(yàn)?是否需求HRP偶聯(lián)的單克隆HA標(biāo)簽抗體?還是一個(gè)兔來(lái)歷的HA多抗更適宜?
一般來(lái)說(shuō),使用類型越多,在使用過(guò)程中的挑選地步就越大,而小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩(wěn)定性都要優(yōu)于多克隆抗體,而多克隆。別的,抗體的效價(jià)也是調(diào)查該抗體性價(jià)比的重要方面,也即相當(dāng)于實(shí)際使用時(shí)的稀釋比率。
一個(gè)效價(jià)高的100μl HA抗體(假如其WB檢測(cè)的稀釋比率是1:5000,終究使用液相當(dāng)于500ml),要比效價(jià)低的1ml的HA抗體(假如WB檢測(cè)的稀釋比率是 1:200,終究使用液相當(dāng)于200ml)性價(jià)比更高。
因此在挑選抗體的時(shí)分,不但需求考慮抗體的量,還需求考慮抗體的效價(jià),即不同使用的主張稀釋比率。
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