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當(dāng)前位置:研域(上海)化學(xué)試劑有限公司>>技術(shù)文章>>讓細胞活躍的訣竅你知道多少?
細胞但是許多生物學(xué)試驗的主角。如果細胞心境欠好,那么試驗的效果也不會好到哪兒去。如何讓細胞活躍?
1. 保證一切試驗室資料都無菌
穿插污染是細胞培育的大敵。即使是輕微的污染,也或許毀了幾個星期的效果。因培育箱內(nèi)溫暖潮濕,真菌極易成長,因而有必要留意定時清潔。此外,在將培育瓶、移液管及其他的相關(guān)物品放入超凈臺之前,運用酒精擦洗潔凈,以防止污染。
2. 小心處理您的培育物
細胞培育的脆弱性怎么著重也不為過。劇烈搖晃,或連續(xù)的溫度波動或許會對成長發(fā)生不利的影響。保證培育箱是水平的,溫度均一,且遠離電動儀器。此外,盡量防止一次處理多個細胞系,由于它或許會影響細胞的基因型和表型。您還應(yīng)定時完成STR圖譜剖析,以承認(rèn)細胞系的身份。
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3. 在運用前正確凍結(jié)細胞
盡管凍結(jié)看起來是個簡略的步驟,但有必要操作妥當(dāng),以免傷害細胞。長時刻暴露在高溫條件下會使細胞無法鋪板。因而,凍存管應(yīng)當(dāng)在37°C水浴中放置2分鐘,然后用條件培育基稀釋,以防止DMSO形成直接傷害。
4. 運用對數(shù)成長期的細胞
細胞培育進程共有3個階段:停滯期、對數(shù)期和平臺期,分別代表了低細胞成長、高細胞成長和無細胞成長。有活力的細胞是健康的,快速分裂的,在對數(shù)期以70-80%的集合度存在。
5. 在傳代之前不要讓細胞*集合
集合度是指貼壁細胞占有培育瓶表面積的份額。*集合意味著100%的表面都被貼壁細胞掩蓋。一定要防止這種狀態(tài),由于它意味著細胞不能持續(xù)成長。不過,燃眉之急是運用活潑成長的細胞。
6. 選擇上佳的培育基開發(fā)策略
在細胞培育進程中,培育基是控制產(chǎn)品質(zhì)量、產(chǎn)量和本錢的*重要因素。有必要針對每種培育物來定制培育基,以優(yōu)化試驗效果。在決定以哪種方式來開發(fā)您的培育基時,您有幾個選擇。您能夠購買現(xiàn)成的,自己開發(fā),也能夠與另一家公司合作開發(fā)特定的培育基。在這個進程中,您需要考慮時刻和本錢等因素。
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