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          關(guān)于細(xì)胞因子ELISA試劑盒的五種檢測辦法

          時間:2019/9/29閱讀:2912
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          細(xì)胞因子ELISA試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗體ELISA檢測。ELISA是研究蛋白抗體的重要辦法。它采用抗原與抗體的特異反響將待測物與酶進(jìn)行直接或直接結(jié)合,然后通過酶與底物發(fā)生顏色反響,進(jìn)行定性和定量分析。接下來我們來介紹細(xì)胞因子ELISA試劑盒的五種檢測辦法。
              
          一、直接法
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          使用了二抗添加信號強(qiáng)度,也使抗體的挑選多樣化,可是直接法簡單發(fā)生穿插反響。直接法只能用于測定抗體,首要用于疾病的診斷,其優(yōu)點是只需要改變包被抗原,酶標(biāo)抗體是通用的。
           
          二、捕獲法
             
          全稱捕獲包被法也稱為反向直接法,首要用于測定血清中某類抗體亞型如IgM。為掃除血清中IgG的攪擾,用抗IgM抗體包被后用于捕捉樣本中的IgM,然后加入特異性結(jié)合抗原進(jìn)行后續(xù)檢測。在測定IgM的試驗中常遭到類風(fēng)濕因子(RF,一種能結(jié)合多種動物IgG Fc的自身IgM抗體)的攪擾,導(dǎo)致假陽性反響。采用F(ab')或Fab片段制備酶標(biāo)抗體可以消除RF的攪擾,這一辦法在雙抗體夾心法中也具有同樣的功效。
             
          三、競爭法
           
          是用樣本中的游離抗體/抗原與固相的酶標(biāo)抗體/抗原競爭性結(jié)合的分析辦法。當(dāng)游離抗體(或抗原)濃度越高,則能與固定抗原(或抗體)結(jié)合的酶標(biāo)抗體(或抗原)就越少,后續(xù)顯色就越淺,即與對照比較,顯色越淺,表示檢測樣本中抗體(或抗原)含量越高。該法特別適合小分子物質(zhì)的檢測也可用于檢測比較不純的樣本,且重復(fù)性好,可是檢測的靈敏度和專一性較差。競爭法測抗原常用于檢測小分子抗原及半抗原,這類抗原一般缺少兩個以上的識別位點,不適用于雙抗夾心法進(jìn)行測定。
            
          四、直接法
           
          僅需要抗原和酶標(biāo)一抗,操作簡潔,可防止穿插反響,可是該辦法要求酶標(biāo)一抗有較高的特異性要求,一起也并非所有的一抗適合標(biāo)記處理。直接法在實際運用中并不多見,它并不能對樣本中抗體進(jìn)行定量分析,因為樣本中抗體是非酶標(biāo)抗體,無法進(jìn)行后續(xù)顯色,可是該法經(jīng)過改進(jìn)便是競爭法。

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