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當(dāng)前位置:研域(上海)化學(xué)試劑有限公司>>技術(shù)文章>>研域課堂:血清攪擾性內(nèi)源性與外源性物質(zhì)的詳解
ELISA試劑盒檢測中血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本,標(biāo)本中攪擾性物質(zhì)是引起檢測后成果偏高或偏低的主要原因,攪擾性物質(zhì)分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩大類:
1、外源性物質(zhì)
外源性物質(zhì)常常是因為用于ELISA試劑盒測定的血標(biāo)本的收集、儲存等不當(dāng)所形成的。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本儲存過久、標(biāo)本凝聚不全和采血管中添加物等影響。
1)標(biāo)本溶血
因為各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時釋放出很多具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為符號的ELISA試劑盒測定中,會導(dǎo)致非特異性顯色,攪擾測定成果。
2)標(biāo)本受細(xì)菌污染:因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,因此,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,亦可發(fā)生非特異性顯色而攪擾測定成果。
2、內(nèi)源性物質(zhì)
常見的攪擾物質(zhì)有:類風(fēng)濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原本身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig(s)抗體、穿插反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。
1)類風(fēng)濕因子:血清中IgM、IgG型類風(fēng)濕因子(RF)在ELISA試劑盒檢測中,可與ELISA試劑盒體系中的捕獲抗體及酶符號二抗的FC段直接結(jié)合,然后導(dǎo)致檢測OD值偏高。
2)補體:ELISA試劑盒體系中固相一抗和符號二抗過程中,抗體分子發(fā)生變構(gòu),其FC段的補體C1q分子結(jié)合位點被露出出來,使C1q能夠?qū)⒍哌B接起來,然后形成檢測OD值偏高。
3)嗜異性抗體:人類血清中含有能與嚙齒類動物(如鼠等)Ig(s)結(jié)合的天然嗜異性抗體,可將ELISA試劑盒體系中一抗和二抗連接起來,也能形成檢測OD值偏高。
此外血清中嗜靶抗原本身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig(s)抗體、穿插反應(yīng)物質(zhì)及血清中脂質(zhì)過高、膽紅素、血紅蛋白及血液粘度過大等,均對ELISA試劑盒測定成果有攪擾效果。
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