通常是在低滴度的病毒。它用于貯存或進(jìn)一步的應(yīng)用,常常需要將其濃縮。是一種快速,簡單,廉價的方法所需的,集中病毒和去除雜質(zhì)。描述BioVision的PEG病毒降水工具包提供了一個簡單,方便,節(jié)省時間的方法,集中病毒不超離心。該試劑盒可用于的小實驗室樣品或大型的高產(chǎn)量和高病毒滴度的病毒制劑。該試劑盒可用于集中在細(xì)胞培養(yǎng)基中或環(huán)境樣品的反轉(zhuǎn)錄病毒,桿狀病毒,慢病毒,和噬菌體等。病毒可以集中超過100倍。
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備注:本公司銷售的所有產(chǎn)品僅用于生化科研試驗
產(chǎn)品名稱 :
Lentivirus concentration PL liquid
品牌 :
BIOMIGA
貨號 :
V2001-01
規(guī)格 :
25ML
50ML
250ML
500ml
5L
詳細(xì)信息 :
簡介:
通常是在低滴度的病毒。它用于貯存或進(jìn)一步的應(yīng)用,常常需要將其濃縮。是一種快速,簡單,廉價的方法所需的,集中病毒和去除雜質(zhì)。描述BioVision的PEG病毒降水工具包提供了一個簡單,方便,節(jié)省時間的方法,集中病毒不超離心。該試劑盒可用于的小實驗室樣品或大型的高產(chǎn)量和高病毒滴度的病毒制劑。該試劑盒可用于集中在細(xì)胞培養(yǎng)基中或環(huán)境樣品的反轉(zhuǎn)錄病毒,桿狀病毒,慢病毒,和噬菌體等。病毒可以集中超過100倍。經(jīng)過優(yōu)化的病毒重新懸浮液提供zui大化病毒的
恢復(fù)40-100%取決于病毒的類型和來源。整個交易過程采用無毒的試劑。可用于濃縮的病毒感染,病毒DNA或RNA純化等
試劑儲存條件:
該解決方案是準(zhǔn)備使用和穩(wěn)定的12個月,在4℃或在-20℃下長期貯存。
協(xié)議:
步驟一:病毒生產(chǎn)
1感染的細(xì)胞,并允許孵育,只要必要的接近zui大病毒生產(chǎn)的應(yīng)變和細(xì)胞類型的組合。
2,7分鐘,于1000rpm離心培養(yǎng)。
3,重懸細(xì)胞沉淀在新鮮的培養(yǎng)基。一個額外的48小時的孵育。
4,離心機在14000rpm,15分鐘,以除去細(xì)胞文化。
5,收集上清,加入1倍體積的PEG溶液4倍體積的含有病毒上清。
6,放入冰箱冷藏過夜(穩(wěn)定在4°C)?2周。
7,2300RPM離心45分鐘。
8,除去上清液。
9,病毒顆粒重新懸浮在1/10到1/100的原始體積。
10,分裝在小樣品和存儲在-70°C使用。
注:
A)。對于高滴度的病毒制劑,再懸浮的體積應(yīng)限于至約3倍體積的白色沉淀,通常為1/10?1/100的原始樣品的體積。如果不溶性物質(zhì)中存在的病毒懸浮液,它可以通過離心除去在3,200 xg離心15分鐘,在4℃。
的B)。避免凍結(jié)和解凍周期,以zui大限度地提高病毒的恢復(fù)。
C)。痕量的病毒懸浮液中的PEG不會影響使用濃縮的病毒。在某些情況下,PEG可能會增加病毒感染效率。但是,如果需要,除去微量的PEG可以通過下面的過程:加入1倍體積的含有4 M氯化鉀和50mM的Tris-HCl,pH7.2的(未提供)的溶液的濃縮的病毒懸浮液中的3倍體積的。或者,固體KCl添加到病毒懸浮液中,至終濃度為1 M.坐在冰15-30分鐘。分拆在4℃下以12,000 xg離心10分鐘以除去沉淀物。仔細(xì)收集病毒上清。等分并存儲在-70℃下以供將來使用。