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產(chǎn)品簡介

磷酸化蛋白提取試劑盒用于哺乳動物組織和細胞中提取總蛋白，試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑，作用較為強烈，可快速獲得總蛋白，可用于免疫印跡實驗等基礎(chǔ)研究實驗，由于含有上述的酶抑制劑，不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品僅用于科研。

產(chǎn)品組成:

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；
稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直至沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；
將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清至新的管中；
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細胞需要裂解液1ml；
貼壁細胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細胞裂解液；在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞，
將刮離的細胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細胞：4 oC 400g離心收集細胞，用冷的PBS洗兩次細胞，同樣按細胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

備注：以上數(shù)據(jù)均來自公開文獻, Solarbio暫未進行獨立驗證, 僅供參考。These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.

公司簡介

上海索萊寶生物科技有限公司是一家集銷售生化試劑、實驗耗材、自產(chǎn)分子生物學產(chǎn)品為一體，并能提供的專業(yè)性生物科技公司。公司秉承“以客戶為中心，以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨"的發(fā)展理念，在依靠客戶的大力支持和員工的不懈努力下獲得了快速的成長。公司織結(jié)構(gòu)清晰，內(nèi)部管理科學，擁有一支既分工細致又高度合作的年輕化隊伍，保持了各個部門之間的高效合作運轉(zhuǎn)，充分保障了公司在充滿競爭的市場中處于地位。公司注重與*合作，目前已與Amersham、Amresco、Axygen、BD、Corning、Dragon、Eppendorf等企業(yè)結(jié)成緊密的合作伙伴關(guān)系，代理其世界的*產(chǎn)品，并在全國各地設(shè)有分銷機構(gòu)。我們將以高度的責任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和實驗技術(shù)解決方案。豐富的經(jīng)驗、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫存、準確的交貨時間、競爭力的價格，所有這些都保證了我們向您提供的是專業(yè)的服務(wù)！立足北京，上海，*，隨著產(chǎn)品營銷戰(zhàn)略的不斷延伸，我們將逐步發(fā)展成為*的專業(yè)性生物科技公司。我們希望能夠和尊敬的客戶一起，利用各自的資源優(yōu)勢和勇于進取的敬業(yè)精神，為中國生命科學研究的發(fā)展作出更多的貢獻。為了更好、更全面的發(fā)展，現(xiàn)公司正在誠招各地代商和招聘若干銷售、研發(fā)人員，歡迎垂詢并期待您的加入！

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