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更新時(shí)間:2024-07-27 14:36:55瀏覽次數(shù):1678評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 2.5g |
---|---|---|---|
貨號(hào) | A8350 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | 正確的加熱方式對(duì)瓊脂糖的充分溶解和凝結(jié)至關(guān)重要 |
低熔點(diǎn)瓊脂糖 DNA電泳
貨號(hào):A8350
規(guī)格:2.5g/5g/100g
DNA、脂蛋白和免疫電泳用;由于其低熔點(diǎn)的特性特別適用于DNA等回收。
A low-melting agarose that melts between 62-68 °C and remains liquid for several hours at 37°C. Ideal for purification of macromolecules from agarose slices and for in-gel enzymatic manipulations.
DNase (P/F)
EEO (-Mr) 0.12
Gel Strength (1.0%) (g/cm2) 250
Gelling Range (1.0%) (°C) 24 - 29
Melting Range (°C) 62 - 68
Moisture (%) < 10
Protease (P/F)
RNase (P/F)
Sulfate (%) 0.1
正確的加熱方式對(duì)瓊脂糖的充分溶解和凝結(jié)關(guān)重要,在此,我們提供以下幾點(diǎn)作為正確制備瓊脂糖凝膠的操作參考。
? 瓊脂糖加熱溶解所需時(shí)間短。
? 瓊脂糖在TAE或者TBE緩沖液中不溶解,加熱時(shí),瓊脂糖顆粒水化形成溶液,水化是時(shí)間依賴(lài)的,不同的瓊脂糖水化點(diǎn)不同。瓊脂糖純度高,超微顆粒,非常適合作為電泳實(shí)驗(yàn)載體。對(duì)比于其他的瓊脂糖,瓊脂糖水化速度快,使用者無(wú)需煮沸過(guò)長(zhǎng)時(shí)間,否則易導(dǎo)致膠液濃稠,不利于混勻,凝膠后易破損。
瓊脂糖凝膠制備
用1×TBE溶液配制1%濃度瓊脂糖凝膠
1.用于制備膠液的錐形瓶體積應(yīng)為膠液體積的2-4倍,緩慢向緩沖液中加入瓊脂糖,邊加邊攪拌,防止瓊脂糖聚集。記錄瓶體和溶液總重量。
2.微波爐高火加熱30s,根據(jù)配制的溶液體積調(diào)整加熱時(shí)間。加熱時(shí)間與微波爐、瓶體大小和瓊脂糖濃度有關(guān)。
3.搖勻瓊脂糖溶液。
4.再次高火加熱30s,搖勻瓊脂糖溶液。
5.將溶液再次放回微波爐,高火加熱沸騰(大約10-35s)。接觸移動(dòng)時(shí)瓊脂糖膠液可能會(huì)劇烈沸騰,小心操作,避免燙傷。從微波爐拿出后,室溫冷卻1-2min,輕輕搖晃使液體里的氣泡溢出。
6.重新放回微波爐,高火加熱,使之沸騰約15s,觀察瓊脂糖的溶解狀態(tài),如果仍有顆粒存在,重復(fù)該步驟直所有晶體全部溶解。
7.待瓊脂糖*溶解成液體,重新稱(chēng)量總重量,計(jì)算蒸發(fā)液體量,用水補(bǔ)齊原始重量,搖勻液體。
8.建議膠液冷卻50-55℃時(shí)灌膠,有利于凝膠孔徑均勻*,不于損傷制膠儀。灌膠前輕輕搖晃瓊脂糖溶液,釋放膠液中殘存的氣泡。
9.向制膠槽中灌膠,一般膠的厚度3-5mm,灌膠后盡量排除梳孔之間或底部的氣泡。
10.在室溫放置(30-45min)使膠充分凝結(jié)。
如果要制備不同濃度和不同體積的凝膠,請(qǐng)注意以下兩點(diǎn):
1.在凝膠溶液煮沸前少進(jìn)行2次搖勻。
2.膠液沸騰后,每隔10-15s觀察一次膠液溶解程度(間隔時(shí)間取決于膠液濃度和體積)。
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低熔點(diǎn)瓊脂糖 DNA電泳
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