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一、服務概述
實時熒光定量PCR（Real Time PCR）技術，是指在PCR指數(shù)擴增期間通過連續(xù)監(jiān)測熒光信號強弱的變化來即時測定特異性產(chǎn)物的量，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。熒光定量PCR的熒光檢出方法包括SYBR green（熒光染料摻入法） 和Taqman probe （探針法）兩種方法。
二、服務內(nèi)容
1.從動物細胞、人或動物組織、細菌、植物、血清、土壤等樣品中提取核酸；
2.對核酸進行濃度及純度分析；
3.熒光定量PCR檢測；
（1）引物和探針的設計與合成；
（2）定量和相對定量的選擇；
（3）探針法和染料法的選擇；
（4）熒光定量PCR儀對目的基因的檢測；
（5）數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析；
4.預實驗服務：根據(jù)客戶提供的目的基因序列或NCBI序列號提供客戶引物和探針，并篩選出優(yōu)化的引物和探針；
5.正式實驗服務：根據(jù)預實驗篩選的引物和探針對所用樣品進行熒光定量PCR的檢測，并對結果進行統(tǒng)計和分析。
三、樣品要求
細胞＞1×106個；組織＞50mg；細菌濕重＞50mg；植物＞100mg；血清＞50μl；土壤干重＞200mg。
四、收費標準
| 項目服務 | 內(nèi)容 | 周期（工作日） | 收費標準 |
| 抽提樣品DNA或RNA | 細胞樣品 | 5 | 200元/樣本 |
| 組織樣品 | 5 | 200元/樣本 | |
| 引物設計與合成 | 優(yōu)化引物&探針設計及合成 | 5 | 2500元/對 |
| RT反應 | mRNA反轉錄成cDNA | 5 | 200元/樣本 |
| 預實驗：熒光PCR體系優(yōu)化 | 確定熒光PCR反應條件 | 5 | 200元/樣本 |
| 標準曲線制作 | 相對定量（不需要） | 15 | 免費 |
| 定量（需要） | 免費 | ||
| 熒光PCR檢測 | 基因（包括目的基因和內(nèi)參基因） | 10 | 300元/樣本 |
五、客戶需提供
1.請?zhí)峁┬迈r材料或直接提供已純化的DNA/RNA，確?？偭?gt;5μg/樣品。如果目的基因表達量較低時，應盡量提供更高濃度的總RNA或DNA；
2.請?zhí)峁┮阎娜L基因序列（GeneBank Accession Number、Gene ID）；
3.請?zhí)峁┍M可能詳細的背景資料：生物物種信息（Human、Mouse、Rat等）、DNA/RNA來源、豐度等；
4.客戶可以提供引物，沒有引物的情況下，本公司幫助設計合成。
六、索萊寶提供
1.RNA抽提和PCR擴增電泳結果的數(shù)碼拍照，定量PCR實驗結果原始文件及相關軟件；
2.提供實驗報告，包括實驗方法、步驟、所用試劑、儀器、數(shù)碼照片及相關分析數(shù)據(jù)等，如有必要可以協(xié)助客戶進行相關的數(shù)據(jù)處理和分析。
七、索萊寶優(yōu)勢
1.采用480II型實時熒光定量PCR儀，提供可靠的數(shù)據(jù)；
2.嚴格的質控標準，豐富的引物設計經(jīng)驗，確保實驗成功；
3.*溝通，強大的實時解決您的問題；
4.完整的實驗報告，讓您輕松分析實驗結果。
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