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色譜法是一種常見(jiàn)的分離技術(shù),其原理是利用欲分離組分在兩相間具備不同的分配系數(shù),以流動(dòng)相對(duì)固定相中的混合物進(jìn)行洗脫,混合物中的不同物質(zhì)以不同速度沿固定相移動(dòng),最終達(dá)到分離的效果。
按兩相的物理狀態(tài),可以分為氣相色譜法(GC)和液相色譜法(LC),在現(xiàn)代樣品分析中,氣相色譜和液相色譜都是普遍采用的分析方法,但兩者也存在許多不同之處,具備不同的特性,這些特性也決定了它們不同的應(yīng)用范圍。
一、GC與LC的主要差異
1. 流動(dòng)相區(qū)別
GC:流動(dòng)相為惰性氣體,流動(dòng)相與組分無(wú)親合作用力,只與固定相有相互作用。
LC:流動(dòng)相為液體,流動(dòng)相與組分間有親合作用。
2. 色譜柱長(zhǎng)度區(qū)別
GC:色譜柱長(zhǎng)度在幾米到幾十米不等。氣相色譜由于載氣的相對(duì)分析量較低,分子間隙大,故粘度低,流動(dòng)性好,組分在氣相中流動(dòng)速度快,因此可以增加柱長(zhǎng),以提高柱效。
LC:色譜柱通常在幾十到幾百毫米。
3. 分析樣品選擇性
GC:相對(duì)分子質(zhì)量較?。ㄒ话阈∮?/span>1000),低沸點(diǎn)(一般小于500℃),易揮發(fā),熱穩(wěn)定性。
LC:更適用于分析高沸點(diǎn),難揮發(fā),熱穩(wěn)定性差,分子質(zhì)量較大(1000 - -2000)的液體化合物。
據(jù)統(tǒng)計(jì),氣相色譜能分析的有機(jī)物只占全部有機(jī)物的15%-20%,其可分析樣品的范圍小于液相色譜,但隨著近幾年技術(shù)的更新,如頂空進(jìn)樣和裂解進(jìn)樣等,進(jìn)一步擴(kuò)大了氣相色譜的分析范圍。
4. 檢測(cè)器差異
GC:氫火焰離子化檢測(cè)器(FID),熱導(dǎo)檢測(cè)器(TCD),電子捕獲檢測(cè)器(ECD),火焰光度檢測(cè)器(FPD),氮磷檢測(cè)器(NPD)。
LC:紫外檢測(cè)器,熒光檢測(cè)器,示差折光檢測(cè)器。
5. 其他方面
GC:需要將樣品在氣化室氣化,需要較高的檢測(cè)溫度,采用尖頭進(jìn)樣針。
LC:不必對(duì)樣品氣化,常溫即可檢測(cè),采用平頭進(jìn)樣針。
二、GC與LC的主要相同點(diǎn)
最基本的原理相同,都是吸附-脫附平衡,利用組分在固定相和流動(dòng)相中的分配系數(shù)不同達(dá)到分離的目的。也就是說(shuō),兩者都是利用物質(zhì)在流動(dòng)相和固定相中的分配系數(shù)的差別,從而在兩相間反復(fù)多次(1000-1000000次,甚至更多)的分配,使原來(lái)分配系數(shù)差別很小的各組分分離開(kāi)來(lái)。在本質(zhì)上,都是利用“相似相溶"原理,利用色譜柱進(jìn)行分離。
三、小結(jié)
氣相色譜具有分離效率高,分離速度快,樣品用量少,選擇性好,檢測(cè)靈敏度高等特點(diǎn),在食品、環(huán)境、化工等領(lǐng)域都具有廣泛的用途;液相色譜分析范圍廣,對(duì)于難分離混合物的分析具有很好的準(zhǔn)確性,樣品回收容易,因此液相色譜不僅僅作為一種分析方法,也作為一種分離手段應(yīng)用在食品醫(yī)藥等行業(yè)。
隨著應(yīng)用領(lǐng)域的不斷深入,單一的色譜分析技術(shù)已經(jīng)不能滿(mǎn)足現(xiàn)有的市場(chǎng)需求,所以誕生了氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(GCMS)、液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(LCMS)等新的分析技術(shù),用于更好地分離分析樣品。
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