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北京中諾泰安科技有限公司 程艷：    

 大腸桿菌O157:H7的測試片檢測方法

方法編號：5043

1 適用范圍：用于各類食品以及人體體檢樣品中大腸桿菌O157:H7的檢測。以及突發(fā)事件應急檢測需要。

2 方法原理：采用選擇性顯色培養(yǎng)基作為主要原料，加入專一性酶顯色劑，運用微生物測試片技術，做成一次性快速檢驗產(chǎn)品，通過接種、培養(yǎng)，如果樣品中含有大腸桿菌O157:H7，即可在紙片上呈現(xiàn)紫紅色的菌落。

3 操作方法

3．1 樣品處理：無菌操作取25g（mL）樣品放入含有225mL無菌生理鹽水的采樣瓶或均質杯內，充分振搖或置均質器中制成樣品勻液，靜置片刻。

3．2接種：將測試片水平放在臺面上，小心揭開上蓋膜，用滅菌吸管吸取1 mL樣品上清液或增菌液，均勻加到中央的濾紙片上，然后輕輕將上蓋膜放下，靜置5min。每個樣品接種兩片。

3．3培養(yǎng)：將加了樣的測試片疊放在一起，放入原來的自封袋中，堆疊片數(shù)不超過12片，透明膜向上平放在37℃培養(yǎng)箱內培養(yǎng)15h～24h。

3．4結果觀察：對測試片進行觀察，呈紫紅色的菌落為大腸桿菌O157:H7；呈藍色的菌落為其他大腸菌群。

4附加說明

4．1 本法還可應用于從業(yè)人員體檢、中毒樣品和物體表面的檢測，用取樣棉簽涂抹被測物體表面，放入裝有3mL滅菌生理鹽水的試管中，搖晃10s，然后取1mL接種到測試片上。

4．2注意使用過的紙片上帶有活菌，需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。

4．3出現(xiàn)陽性菌落的樣本，用其他更為可靠的方法進行驗證，沒有條件的話至少再取樣重復檢驗一次。