黄色视频不卡_午夜福利免费观看在线_亚洲国产精品999在线_欧美绝顶高潮抽搐喷水_久久精品成人免费网站_晚上一个人看的免费电影_国产又色又爽无遮挡免费看_成人国产av品久久久

【精子核蛋白染色試劑盒（苯胺藍(lán)染色法）品    名】

精子五聯(lián)檢：精子核蛋白染色試劑盒（苯胺藍(lán)染色法）

【研發(fā)依據(jù)】

正常情況下，與精核DNA結(jié)合的堿性蛋白（核蛋白）將經(jīng)歷從組蛋白到魚精蛋白的自然成熟過程，這種成熟后的魚精蛋白對(duì)精子基因（DNA）具有特殊保護(hù)作用。

組蛋白被魚精蛋白逐漸取代的過程，稱之為精子核蛋白組型轉(zhuǎn)換，這種組型轉(zhuǎn)換具有重要的生理意義。但當(dāng)核蛋白組型轉(zhuǎn)換異常可引起男性不育或胚胎早期夭折流產(chǎn)，其機(jī)理為：①精子DNA不穩(wěn)定且易受損傷而難以受孕；②一旦受精，由于核蛋白組型異常，精子核不能正常解聚，從而影響了雌雄原核的融合；③胚胎不能正常發(fā)育，造成胚胎夭折而流產(chǎn)。

【預(yù)期用途】

主要用于成年男性精子核蛋白的染色，以此評(píng)估成年男性精子成熟比例，可評(píng)價(jià)男性生育功能。

【試劑特點(diǎn)】無須特殊儀器，簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確。

【檢驗(yàn)原理】

成熟精子的核蛋白成份為魚精蛋白，富含精氨酸和胱氨酸殘基；不成熟精子的核蛋白成份為組蛋白，富含賴氨酸殘基。酸性條件下，苯胺藍(lán)與賴氨酸殘基結(jié)合生成紫藍(lán)色化合物，從而指示不成熟核蛋白的存在，而核蛋白成熟的精子則染成紅色。

【組成成份】

試劑主要由苯胺藍(lán)、氧雜蒽、冰醋酸、磷酸鹽緩沖液等配制而成。

【樣本要求】液化后的新鮮精液標(biāo)本

【操作方法】

1．試劑的準(zhǔn)備

1）洗滌工作液的配制：A液（10×濃縮洗滌液）以蒸餾水10倍稀釋，4℃保存?zhèn)溆茫?/span>

2）洗脫工作液的配制：D液（10×濃縮洗脫液）以蒸餾水10倍稀釋，4℃保存?zhèn)溆谩?/span>

2．樣本準(zhǔn)備

1）新鮮精液標(biāo)本置于37℃恒溫水浴箱中*液化。

2）精子的洗滌及稀釋，方法如下： ①在Eppendorf管中加入0.2—0.5ml的精液和洗滌工作液1ml，以一次性吸管反復(fù)吹打精子數(shù)次后，2000轉(zhuǎn)離心5min，棄去上清液，保留管底精子沉淀團(tuán)； ②在Eppendorf管中加入洗滌工作液1.5ml，以一次性吸管反復(fù)吹打精子數(shù)次后，2000轉(zhuǎn)離心5min，棄去上清液，保留管底精子沉淀團(tuán)； ③再次重復(fù)②的操作，離心結(jié)束后，棄去上清液。④在Eppendorf管中加入洗滌工作液約0.1—0.2ml，混合精子懸液。

3．檢測(cè)步驟

1）取上述已制備好的精子懸液15μl，均勻涂布于防脫載玻片上，自然干燥。

2）在涂有待測(cè)精子的涂片區(qū)內(nèi)，滴加B液（固定液）2—3滴，室溫反應(yīng)2min。

3）以流水輕輕沖去載玻片上的試劑（注意控制水流速度，以免洗脫涂片區(qū)內(nèi)的精子），甩去多余水份（注意防止涂片干燥）。

4）在涂有待測(cè)精子的涂片區(qū)內(nèi)，滴加C液（染色液）2—4滴，室溫反應(yīng)5min。

5）以流水輕輕沖去載玻片上的試劑（注意控制水流速度，以免洗脫涂片區(qū)內(nèi)的精子），并甩去多余水份（注意防止涂片干燥）。

6）將載玻片豎直插入已盛有洗脫工作液的反應(yīng)池中，使待測(cè)標(biāo)本涂片區(qū)*浸沒于洗脫工作液中，室溫反應(yīng)5min。

7）以流水輕輕沖去載玻片上的試劑（注意控制水流速度，以免洗脫涂片區(qū)內(nèi)的精子），并甩去多余水份（注意防止涂片干燥）。

8）在涂片區(qū)內(nèi)滴加E液（復(fù)染液）2—4滴，室溫反應(yīng)5min。

9）以流水輕輕沖去載玻片上的試劑（注意控制水流速度，以免洗脫涂片區(qū)內(nèi)的精子），迅速吹干玻片。（如果需要長(zhǎng)久保存該涂片樣本，可選擇完成以下脫水步驟：分別將組織片依次置于70%、90%和100%乙醇中各2min，晾干。）

10）鏡檢。

【染色結(jié)果】

核蛋白不成熟的精子染色呈紫藍(lán)色或紫色，核蛋白成熟的精子染色呈紅色。

【參考值】 DFI（單鏈DNA精子）＜10%為正常；當(dāng)DFI＞25%時(shí)，受精率＜20%。

【注意事項(xiàng)】

1．受試者應(yīng)按照WHO技術(shù)規(guī)范采集精液標(biāo)本。

2．若精液標(biāo)本粘稠度高或液化不*，可導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果非特異性假陽性。需要預(yù)先降低精液粘度或促進(jìn)精液*液化后，才能用于檢測(cè)。

3. 精子密度過高可能導(dǎo)致脫色不均勻，從而對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生不良影響；精子密度過低則不會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果；涂片時(shí)應(yīng)避免涂布過于稠密。

4. 精子洗滌不充分可影響顯微鏡觀察結(jié)果。

5. 染紫藍(lán)色精子為核蛋白不成熟精子，染紅色精子為核蛋白成熟的精子。由于精子核蛋白存在組蛋白-魚精蛋白的過渡期，因此此類精子頭部呈淡藍(lán)色或紫色；精子頭部局部染淡藍(lán)色或紫色、頂體膜邊緣染紫藍(lán)色，均是精子不夠成熟的表現(xiàn)。

6. 鏡下觀察結(jié)果時(shí)，不要在精子堆集分布的區(qū)域計(jì)數(shù)，應(yīng)選擇精子散在分布的區(qū)域進(jìn)行計(jì)數(shù)。

7. 受檢者所有樣品均應(yīng)視為潛在的傳染源，檢測(cè)完畢的樣本、試劑均須作為醫(yī)療廢物處理，避免污染環(huán)境。

8．精子核蛋白染色試劑盒為體外診斷試劑，檢測(cè)結(jié)果僅供臨床參考，對(duì)患者的臨床管理應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其它實(shí)驗(yàn)室檢查及治療反應(yīng)等情況結(jié)合考慮。

【基本信息】

產(chǎn)品注冊(cè)證號(hào)：閩明食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2013第1400022號(hào)

執(zhí)行產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)：YZB/閩明0034-2013

醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)許可證號(hào)：閩食藥管械生產(chǎn)許第20110297號(hào)

規(guī)  格：20人份/盒、40人份/盒

存儲(chǔ)條件及有效期：試劑盒于2-8℃避光保存，有效期12個(gè)月。

【附錄】

影響精子受精或男性不育的因素

1.精子死亡率過高

2.精子畸形率過高

3.精子成熟率過低

4.精子染色體異常

5.精子數(shù)量過少

6.精子活動(dòng)力過低

7.精子液化能力過低

三明市和眾生物技術(shù)有限公司——生殖醫(yī)學(xué)檢測(cè)試劑盒系列

1、精子DNA檢測(cè)試劑盒

2、精子DNA碎片檢測(cè)試劑盒

3、精子活性檢測(cè)試劑盒

4、精子形態(tài)學(xué)檢測(cè)試劑盒

5、精子核蛋白檢測(cè)試劑盒

五項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)，診斷分析精子的受精及生育能力，無須儀器，簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確，不孕不育科的*診斷方案。