FITC、羅丹明B、CY3/CY5熒光標記多糖

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FITC、羅丹明B、CY3/CY5熒光標記多糖

植物多糖具有的生物活性，由于多糖結(jié)構(gòu)中缺少發(fā)光基團，難以直接檢測。所以采用熒光物質(zhì)對多糖進行標記。FITC具有量子產(chǎn)率、長、光和溫度系數(shù)低等，是目前應用的熒光之一。

紅芪多糖（Hedysarum polybotys saccharide,HPS)具有、降血糖、提、抗骨質(zhì)疏松和抗纖維化等生物活性。利用紅芪多糖具有還原性末端的特點，通過半縮醛基的還原胺化反應引入仲氨基，進而與FITC發(fā)生親核反應，實現(xiàn)多糖的熒光標記。

HPS-3的熒光標記：HPS-3溶于磷酸鹽緩沖液（PBS)中,依次加入Tyr，于37℃水浴反應96h，得到HPS-3-Tyr。將HPS-3-Tyr溶于蒸餾水，用Na2CO2調(diào)節(jié)pH值,加FITC,室溫下避光反應過夜，向反應物中加入4倍量無水乙醇，有黃綠色沉淀析出，用水溶解沉淀，溶液上 Sephadex G-100柱純化，得到HPS-3-FITC。

FITC對紅芪多糖HPS-3進行熒光標記，其建立的體內(nèi)組織中定量分析方法和組織分布為進一步研究紅芪多糖的作用機制和相關組學了基礎。

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