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一、雙抗體夾心法
1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡(jiǎn)稱洗滌，下同）。
2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。（同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔）。
3. 加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
4. 加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5. 終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽性。
二、間接法
1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃；
2.次日洗滌3次；
3.加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌；
4.（同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照）于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體（抗抗體）0.1ml；
5.37℃孵育35-60分鐘，洗滌；
6.zui后一遍用DDW洗滌。
其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
大鼠15-脂加氧酶(15-LO)ELISA試劑盒標(biāo)本收集:
血清：全血標(biāo)本于室溫放置2小時(shí)或4℃后于1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原，無內(nèi)毒素試管。血漿：抗凝劑推薦使用EDTA，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測(cè)。避免使用溶血，高血脂標(biāo)本。其它生物標(biāo)本：1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)標(biāo)本應(yīng)清澈透明，懸浮物應(yīng)離心去除。標(biāo)本收集后若不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次使用量分裝，凍存于-20℃/-80℃電冰箱內(nèi)，避免反復(fù)凍融，6個(gè)月內(nèi)進(jìn)行檢測(cè),4℃保存的應(yīng)在1周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。 如果樣本中檢測(cè)物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品zui高值，請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況，做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建議先做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以確定稀釋倍數(shù))。
酶標(biāo)儀(450nm波長(zhǎng)濾光片)高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL,200-1000μL37℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水。
大鼠15-脂加氧酶(15-LO)ELISA試劑盒 其他試劑盒：
大鼠碳酸酐酶(CA)ELISA 試劑盒
大鼠胎盤生長(zhǎng)因子(PLGF)ELISA 試劑盒
大鼠髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)ELISA試劑盒
大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒
人EB病毒衣殼抗原IgA(EBV-VCA-IgA)ELISA試劑盒（定性）
人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)ELISA試劑盒
人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒
人胱天蛋白酶9(Casp-9)Elisa試劑盒（細(xì)胞上清液）
人EB病毒早期抗原(EA)IgA ELISA試劑盒（定性）
山羊傳染性胸膜肺炎病抗體Elisa試劑盒（定性）
人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒
大鼠前列腺素Ｅ２（PGE2）ELISA試劑盒
小鼠大內(nèi)皮素(BigET)ELISA試劑盒
豬口蹄疫抗體ELISA 試劑盒（定性）
小鼠IL-4 Elisa試劑盒
小鼠IFN-r Elisa試劑盒
禽流感抗體ELISA試劑盒（定性）
黃曲霉毒素B1Elisa試劑盒
豬藍(lán)耳病抗體ELISA試劑盒（定性）
豬瘟抗體ELISA試劑盒（定性）
禽流感抗體ELISA試劑盒（定性）
人內(nèi)皮素-1（ET-1）ELISA試劑盒
人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白NAGL ELISA試劑盒(血清）
人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白NAGL ELISA試劑盒(尿液）
人EB病毒衣殼抗原IgA(EBV-VCA-IgA)ELISA試劑盒（定性）
人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒（尿液）
人EB病毒早期抗原(EA)IgA ELISA試劑盒（定性）
小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)Elisa試劑盒
小鼠免疫球蛋白G1(IgG1)Elisa試劑盒
小鼠免疫球蛋白G2a(IgG2a)Elisa試劑盒
人尿白細(xì)胞介素-18（IL-18）Elisa試劑盒（尿液）
山羊傳染性胸膜肺炎抗體Elisa試劑盒(定性）
人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4(FGF4)ELISA試劑盒
人腎損傷因子-1(KIM-1)Elisa試劑盒（尿液）
大鼠抗II型膠原蛋白抗體Elisa試劑盒
