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          上海賽默生物科技發(fā)展有限公司
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          紫外可見分光光度計(jì)的應(yīng)用

          閱讀:2573發(fā)布時(shí)間:2018-1-16

            在一個(gè)波長,一個(gè)溶液的總吸光度是等于各個(gè)成分的吸光度的總和。根據(jù)這點(diǎn)就可分析混合物的各個(gè)組分。
           
            如果有一種混合物,雖然是多組分,但組分吸收帶不相重迭。在某波長一種組分的吸收很大,而其它組分在此波長則無吸收。這樣就可在此波長采用上述的標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行此組分的定量測定。
           
            如果一個(gè)多組分混合物,其吸收帶雖然相互重迭,但能遵守比耳定律,則可以采用解聯(lián)立議程式的辦法來進(jìn)行定量。如混合物中含有n個(gè)已知組分,則需在n個(gè)適當(dāng)?shù)牟ㄩL進(jìn)行n次組分各自在n個(gè)波長的摩爾吸光系數(shù)。波長的選擇應(yīng)注意使一個(gè)組分的吸光系數(shù)比其它組分的吸光系數(shù)大,這樣才能得到較高的度。
           
            如果混合物中的幾個(gè)組分吸收帶相互重迭的并且不遵守比耳定律,便不能用解聯(lián)立方程式的辦法來解析。此時(shí)用分光光度法定量比較困難。Fry采用校正法把混合樣品中的五個(gè)組分配成不同的溶液,得到一系列校正曲線。在校正曲線的基礎(chǔ)上,解析得到了五組分的含量。但方法十分繁瑣,使用不便。
           
            如果混合物中含有未知吸收帶的組分就更困難了。此時(shí)先用化學(xué)法分離純化。但也可直接利用分光光度法來分析。Morton利用有雜質(zhì)存在吸收光譜形狀的改變計(jì)算混合物中含有雜質(zhì)時(shí)魚肝油的量。雖然利用分光光度法可以作多組分分析,但方法比較繁瑣。
           
            近年來,很多分光光度計(jì)設(shè)有多組分分析附件。借助于微處理機(jī)來分析計(jì)算混合物中多種組分的含量,十分簡便、迅速、準(zhǔn)確。使得分光光度法在混合的定量分析中發(fā)揮更大的作用。同樣,也可用后面介紹的導(dǎo)數(shù)光譜法來定量。

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