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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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40719ES50鈣黃綠素 Calcein AM超純級
| 參考價: | 面議 |
具體成交價以合同協(xié)議為準- 40719ES50 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：3877更新時間：2022-10-28 16:40:59
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
|---|
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 儲存 | 價格（元） | *（元） |
鈣黃綠素 Calcein AM超純級 | 40719ES50 | 1×50 μg | -20℃干燥保存 | 199.00 | 189.00 |
40719ES60 | 2×50 μg | -20℃干燥保存 | 369.00 | 350.00 | |
40719ES74 | 20×50 μg | -20℃干燥保存 | 3287.00 | / | |
40719ES80 | 1 mg | -20℃干燥保存 | 2637.00 | / |
產(chǎn)品描述
鈣黃綠素 Calcein AM超純級是一種對活細胞進行熒光標記的細胞染色試劑，發(fā)綠色熒光（Ex=490 nm，Em=515 nm）。 因其在傳統(tǒng)的Calcein（鈣黃綠素）基礎上引入乙酰甲氧基甲酯（AM）基團，增加了疏水性，使其能夠輕易穿透活細胞膜。一旦進入細胞后，Calcein-AM（本身不發(fā)熒光）被細胞內(nèi)的酯酶剪切形成膜非滲透性的極性分子Calcein，從而被滯留在細胞內(nèi)并發(fā)出強綠色熒光。與其它同類試劑（如BCECF-AM和CFDA）相比，由于Calcein, AM細胞毒性極低，適合用于活細胞染色的熒光探針，而且不會抑制任何的細胞功能，如增殖和淋巴球的趨化性。
由于死細胞缺乏酯酶，鈣黃綠素 Calcein AM超純級僅用于對活細胞的細胞生存能力測試和短期標記。作為核染色染料的碘化丙啶不能穿過活細胞的細胞膜，它穿過死細胞膜的無序區(qū)域而到達細胞核，并嵌入細胞的DNA雙螺旋從而產(chǎn)生紅色熒光(激發(fā)：535 nm，發(fā)射：617 nm)，因此PI僅對死細胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激發(fā)，因此可用熒光顯微鏡同時觀察活細胞和死細胞。而用545 nm激發(fā)，僅可觀察到死細胞。根據(jù)以上特點，Calcein, AM和PI經(jīng)常被結合用來作為活細胞和死細胞的雙重染色。由于不同細胞系的染色條件不同，我們建議個別確定 Calcein, AM 和 PI的合適濃度。
本品為粉末形式提供的Calcein-AM，超純級別（≥95%），可與碘化丙啶（PI）（Cat No. 40710ES03）聯(lián)合使用，用于活細胞和死細胞的同時檢測?；蛘咧苯淤徺I翊圣提供的Calcein-AM/PI活細胞/死細胞雙染試劑盒（Cat No. 40747ES76）。
產(chǎn)品性質(zhì)
中文名稱（Chinese synonym） | 3-O-乙酰胺-2,7-二(羧乙基)-4或5-羧基熒光素，二乙酰甲酯；鈣黃綠素乙酰甲酯； |
英文名稱（English synonym） | 3,6-Di(O-acetyl)-4,5-bis[N,N-bis(carboxymethyl)aminomethyl]fluorescein, tetraacetoxymethyl ester |
CAS號（ CAS NO） | 148504-34-1 |
分子式（Formula） | C46H46N2O23 |
分子量（Mol. Wt.） | 994.86 |
純度（Purity） | ≥95%（HPLC） |
Ex/ Em（nm） | 490/515 |
結構式 | |
運輸與保存方法
冰袋（wet ice）運輸。-20℃干燥保存，避免直接暴露于強光下，有效期一年。
注意事項
1）對于微量試劑，開封前，請稍微離心一下，以保證粉末落入管底。
2）由于Calcein-AM對濕度非常敏感，本粉末保存的過程中一定要保持干燥。對于配制好的Calcein-AM儲存液需要分裝凍存，且必須緊緊密封蓋子，干燥保存。Calcein-AM工作液必須現(xiàn)配現(xiàn)用。
3）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
4) 本產(chǎn)品僅作科研用途!
使用方法
1. 儲存液的配制
本品是以粉末形式提供的，根據(jù)工作液的濃度將其配制成1000×的儲存液，儲存液配制范圍可為1～50 mM。例如使用的工作液為5 μM，那么可配制5 mM的儲存液，也就是向50 μg Calcein, AM（Mw：994.86）內(nèi)加入10 μl 細胞培養(yǎng)級別的DMSO（CAS NO. 60313ES60）即可得到所需濃度的儲存液。
2. 染色步驟
對于大部分細胞，鈣黃綠素Calcein, AM的工作液濃度為2-5 μM。由于不同細胞系的染色條件不同，初次實驗建議做梯度實驗，以確定 Calcein-AM的適濃度。梯度篩選的原則為使用較低的探針濃度得到更好的熒光結果。
1）使用時，取一管適量的Calcein, AM儲存液（1000×），用PBS（或Hanks和Hepes）緩沖液將其稀釋成相應濃度的染色工作液。
注：有時候可添加一定量的非離子表面活性劑如Pluronic F127（Cat No. 60318ES60）到Calcein AM儲存液內(nèi)來增強其水溶性。制備染色工作液前，取一管需要用的Calcein AM儲存液內(nèi)加入等體積的20% Pluronic F127，使Pluronic F127的終濃度為0.02%。含Pluronic F127的Calcein AM溶液不可長期保存，現(xiàn)配現(xiàn)用。
2）對于貼壁細胞，先用EDTA消化細胞，離心收集細胞（1000 rpm，3 min）。對于懸浮細胞，直接離心收集細胞。
3）去上清，用PBS（或者其他緩沖液）充分清洗細胞2~3次，以充分去除殘留的酯酶活性。
4）用1/10細胞培養(yǎng)基體積的Calcein, AM染色工作液重懸細胞，37℃培養(yǎng)細胞15～30分鐘。
注：如果細胞本身含有有機陰離子轉(zhuǎn)運體，需加probenecid，1-2.5 mM或者苯磺唑酮（sulfinpyrazone，0.1-0.25 mM）到孵育體系內(nèi)以降低去酯化染料calcein泄露到胞外。
5）用PBS（或者其他緩沖液）洗滌細胞兩次去除多余的染料。
注：如有必要，使用含有陰離子轉(zhuǎn)運抑制劑的緩沖液來進行細胞清洗。
6）用含490 nm激發(fā)波長，515 nm發(fā)射波長的濾光片的熒光顯微鏡觀察細胞。
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