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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級(jí)會(huì)員·12年
線粒體紅色熒光探針
| 參考價(jià): | ￥ 425 |
| 訂貨量: | 1 臺(tái) |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：2825更新時(shí)間：2023-02-23 13:54:32
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50ug |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | 40741ES50 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
MitoTracker® Red CMXRos 線粒體紅色熒光探針 | 40741ES50 | 50 µg | 425.00 |
產(chǎn)品描述
MitoTracker® Red CMXRos線粒體紅色熒光探針是一種細(xì)胞滲透型的X-rosamine衍生物，包含標(biāo)記線粒體的弱巰基反應(yīng)性的氯甲基官能團(tuán)。本品是一種氧化型的紅色熒光染料（Ex=579 nm，Em=599 nm），只需簡(jiǎn)單孵育細(xì)胞，即可被動(dòng)運(yùn)輸穿過細(xì)胞膜并直接聚集在活性線粒體上。一旦線粒體被染色后，還能根據(jù)后續(xù)實(shí)驗(yàn)的需求進(jìn)行固定（醛類固定劑如甲醛）和透化（醛類去污劑如Triton X-100），探針依然維持在細(xì)胞內(nèi)。本品適合雙標(biāo)實(shí)驗(yàn)，因其紅色熒光與其他的綠色熒光探針具有良好的分辨率。
雖然傳統(tǒng)的線粒體熒光探針如TMR和羅丹明123，也能很容易的聚集在功能線粒體上，但是一旦線粒體膜電位喪失即會(huì)被洗掉，從而在一些需要細(xì)胞進(jìn)行醛類固定或者包含線粒體能量狀態(tài)影響因子的實(shí)驗(yàn)中，使其應(yīng)用大受限制。
產(chǎn)品性質(zhì)
CAS號(hào)（CAS NO.） | 167095-09-2 |
分子式（Formula） | C32H32Cl2N2O |
分子量（Molecular weight） | 531.52 |
外觀（Appearance） | 紫色固體 |
激發(fā)波長（Ex） | 579 nm |
發(fā)射波長（Em） | 599 nm |
結(jié)構(gòu)式（Structure） |
|
運(yùn)輸和保存方法
室溫運(yùn)輸；-20℃避光干燥保存，有效期1年。
使用方法
1. 儲(chǔ)存液的配制
本品是以粉末形式提供，使用前需將本品回溫至室溫。
之后使用細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)別的無水DMSO（如Yeasen，貨號(hào)：60313ES60）將其充分溶解至終濃度1 mM。
本品M. Wt.= 531.52 g/mol，換算下來，50 µg粉末只需加入94 µL DMSO即可得到1 mM儲(chǔ)存液。
可根據(jù)單次的使用量將儲(chǔ)存液分裝后放到-20℃避光，避免反復(fù)凍融。
2. 工作液的配制
根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖褂貌煌奶结槤舛龋韵碌钠鹗疾僮鳁l件僅作參考，可根據(jù)細(xì)胞類型和其他的相關(guān)因素如細(xì)胞或組織的透化等進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。
用適當(dāng)?shù)木彌_液或者細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋1 mM儲(chǔ)存液至工作液濃度。一般推薦使用濃度為25-500 nM。對(duì)于后續(xù)需要做固定或透化的樣本，推薦工作濃度為100-500 nM，為了降低過度加載導(dǎo)致的潛在偽影和線粒體毒性，在不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的前提下應(yīng)盡可能低濃度染色。另外，濃度過高也可能對(duì)其他細(xì)胞結(jié)構(gòu)進(jìn)行染色。
3. 染色及檢測(cè)
1）貼壁細(xì)胞的染色
培養(yǎng)皿/板內(nèi)加入適量的培養(yǎng)基覆蓋蓋玻片進(jìn)行爬片培養(yǎng)。當(dāng)細(xì)胞長至所需豐度，吸除培養(yǎng)液，加入37℃預(yù)熱的MitoTracker® Red CMXRos染色工作液。在所使用細(xì)胞正常培養(yǎng)條件下孵育15-45 min（最佳孵育時(shí)間需優(yōu)化）。染色結(jié)束后，使用新鮮培養(yǎng)液或緩沖液替換上述染色液，即可將其置于熒光顯微鏡下觀察或熒光酶標(biāo)儀下讀數(shù)?；蛘哌M(jìn)行后續(xù)的固定和透化步驟，見步驟4。
2）懸浮細(xì)胞的染色
離心收集細(xì)胞，吸除上清，利用37℃預(yù)熱的MitoTracker® Red CMXRos染色工作液輕輕重懸細(xì)胞。在所使用細(xì)胞正常培養(yǎng)條件下孵育15-45 min（最佳孵育時(shí)間需優(yōu)化）。染色結(jié)束后，離心收集細(xì)胞，利用37℃預(yù)熱的新鮮培養(yǎng)液或緩沖液重懸細(xì)胞，被染色的細(xì)胞可用流式細(xì)胞儀、熒光酶標(biāo)儀、熒光顯微鏡進(jìn)行分析。
如果需要蓋玻片上固定化的細(xì)胞，那么可在鋪片前先用多聚賴氨酸（poly-D-lysine）包被載玻片或蓋玻片。
或者進(jìn)行后續(xù)的固定和透化步驟，見步驟4。
4. 固定和透化
1）染色結(jié)束后，利用培養(yǎng)液或緩沖液清洗細(xì)胞；
2）小心吸走清洗液。換用新鮮配制且預(yù)熱的含2-4%甲醛的緩沖液或培養(yǎng)液進(jìn)行細(xì)胞固定。經(jīng)驗(yàn)證，本染料MitoTracker® Red CMXRos由含3.7%甲醛的*培養(yǎng)液于37℃孵育內(nèi)皮細(xì)胞15 min能起到良好的固定效果。
3）清洗細(xì)胞：吸除固定液，用適當(dāng)緩沖液沖洗細(xì)胞數(shù)次。
4）細(xì)胞透化（可選）：
像ICC等實(shí)驗(yàn)需要細(xì)胞要做透化，則可將已固定的細(xì)胞直接加入含有去污劑如Triton X-100的緩沖液中孵育。透化結(jié)束后，用緩沖液清洗細(xì)胞即可進(jìn)行后續(xù)ICC實(shí)驗(yàn)。經(jīng)檢測(cè)，利用含0.2% Triton X-100的PBS孵育內(nèi)皮細(xì)胞10 min可以達(dá)到良好的透化效果。
另外，還可利用預(yù)冷的丙酮透化5 min，之后用PBS清洗細(xì)胞。經(jīng)驗(yàn)證，即使后繼沒有進(jìn)一步的抗體標(biāo)記，丙酮透化處理也可降低背景信號(hào)。
注意事項(xiàng)
1）DMSO有毒，使用時(shí)請(qǐng)小心操作。
2）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
3）本產(chǎn)品僅作科研用途！
HB211230
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