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11145ES50Hifair® Ⅲ One Step RT-qPCR Probe Kit
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 11145ES50 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù)：817更新時(shí)間：2022-03-17 16:18:24
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50 T |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | 11145ES50 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
Hifair® Ⅲ One Step RT-qPCR Probe Kit | 11145ES50 | 50 T | 1126.00 |
Hifair® Ⅲ One Step RT-qPCR Probe Kit | 11145ES70 | 200 T | 4126.00 |
產(chǎn)品描述
Hifair® Ⅲ One Step RT-qPCR Probe Kit是以RNA為模板進(jìn)行定量PCR反應(yīng)的試劑盒。在實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中，逆轉(zhuǎn)錄和定量PCR在同一反應(yīng)管中進(jìn)行，簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作，降低了污染的風(fēng)險(xiǎn)。本試劑盒以RNA為模板，使用基因特異性引物，利用耐熱Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase高效合成第一鏈cDNA，并搭配使用探針和UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase，配合優(yōu)化的緩沖體系能夠特異靈敏的對(duì)RNA模板進(jìn)行精確定量。
本試劑盒以預(yù)混的Mix形式提供，2×Hifair® Ⅲ P buffer包含優(yōu)化的緩沖體系和dNTPs等，優(yōu)化了有效抑制非特異性 PCR擴(kuò)增的因子和提升PCR反應(yīng)擴(kuò)增效率的因子，適用于熒光標(biāo)記探針的高特異性檢測(cè)系統(tǒng)。此外，Hifair® UH Ⅲ Enzymes包含比例優(yōu)化的Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase、RNase inhibitor及UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase等。
產(chǎn)品組分
組分編號(hào) | 組分名稱 | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 | |
11145ES50 (50 T) | 11145ES70 (200 T) | ||
11145-A | 2×Hifair® Ⅲ P buffer | 500 μL | 2×1 mL |
11145-B | Hifair® UH Ⅲ Enzymes | 50 μL | 200 μL |
11145-C | Hieff® 50×High Rox | 20 μL | 80 μL |
11145-D | Hieff® 50×Low Rox | 20 μL | 80 μL |
11145-E | RNase free ddH2O | 500 μL | 2×1 mL |
【注】P buffer 為Probe buffer 的簡(jiǎn)寫，UH 為UNICON-Hifair 的簡(jiǎn)寫。
適用機(jī)型
High Rox 適用機(jī)型：ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™
Low Rox 適用機(jī)型：ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex
Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™
不需要 Rox 校正的儀器型號(hào)：
Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™
Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s; Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000
Roche Applied Science LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96
Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler®; Illumina Eco qPCR
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20℃避光保存，有效期1年。本品避免反復(fù)凍融。建議分裝保存。
注意事項(xiàng)
1. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)使用 RNase free 耗材。
2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
反應(yīng)體系（以 20 μL為例）
組分 | 加入量 | 終濃度 |
2×Hifair® Ⅲ P buffer | 10 μL | 1× |
Hifair® UH Ⅲ Enzymes | 1 μL | - |
Hieff® 50×High Rox or Low Rox | 0.4 μL | - |
Gene Specific Primer Forward (10 µM) | 0.4 μL | 0.2 μM |
Gene Specific Primer Reverse (10 µM) | 0.4 μL | 0.2 μM |
TaqMan Probe (10 µM) | 0.2 μL | 0.1 μM |
模板 RNA | Total RNA: 1 pg-1 µg | - |
RNase free ddH2O | to 20 μL | - |
【注】: a 所有試劑使用前應(yīng)充分混勻。
b 參比染料：Rox的添加，可根據(jù)不同儀器型號(hào)進(jìn)行選擇，具體可參考【適用機(jī)型】。
c 引物濃度：通常引物終濃度為0.2 μM，也可以根據(jù)情況在0.1-1.0 μM之間進(jìn)行調(diào)整。
d 探針濃度：探針終濃度可在50 nM-250 nM之間調(diào)整。
e 體系配制：請(qǐng)于超凈工作臺(tái)內(nèi)配制，并使用無(wú)核酸酶殘留的槍頭、反應(yīng)管；推薦使用帶濾芯的槍頭。避免交叉污染和氣溶膠污染。
f 模板稀釋：一步法RT-qPCR靈敏度*，推薦將模板稀釋后(如稀釋至2-5 μL/樣本)加入反應(yīng)體系中，這樣可以有效提高實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性。
g 反應(yīng)體系：建議以大體系進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，如20 μL或50 μL。
標(biāo)準(zhǔn)擴(kuò)增程序
反應(yīng)階段 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) | |
1 | 逆轉(zhuǎn)錄 | 50℃a | 15 minb | 1 |
2 | 預(yù)變性 | 95℃ | 30 sec | 1 |
3 | 擴(kuò)增反應(yīng) | 95℃ | 10 sec | 45 cycles |
60℃ | 30 secc |
【注】: a 對(duì)于含復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)或高GC含量的RNA模板，可將逆轉(zhuǎn)錄溫度提高到55℃，有助于提升擴(kuò)增效率和靈敏度。
b 逆轉(zhuǎn)錄時(shí)間可以根據(jù)模板的復(fù)雜程度進(jìn)行調(diào)整，時(shí)間為5min時(shí)可滿足大多數(shù)基因的鑒定。
c 不同的qPCR檢測(cè)儀器所需的熒光信號(hào)采集時(shí)間不同，請(qǐng)根據(jù)最短時(shí)間限制進(jìn)行設(shè)置。
HB220304
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