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        1. 翌圣生物科技(上海)股份有限公司

          初級(jí)會(huì)員·12年

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          40743ES50線粒體深紅色熒光探針
          參考價(jià): 面議
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          • 40743ES50 產(chǎn)品型號(hào)
          • Yeasen/翌圣生物 品牌
          • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
          • 上海市 所在地

          訪問(wèn)次數(shù):455更新時(shí)間:2022-02-10 14:57:53

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          初級(jí)會(huì)員·12年
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          400-6111-883
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          址:
          上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號(hào)3樓
          網(wǎng)址:
          www.yeasen.com

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介
          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50ul
          貨號(hào) 40743ES50 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè)
          MitoTracker Deep Red FM是一種細(xì)胞滲透型的carbocyanine-based的深紅外紅色熒光探針(Ex=644 nm,Em=665 nm),包含標(biāo)記線粒體的弱巰基反應(yīng)性的氯甲基官能團(tuán),只需簡(jiǎn)單孵育細(xì)胞,即可被動(dòng)運(yùn)輸穿過(guò)細(xì)胞膜并直接聚集在活性線粒體上。
          產(chǎn)品介紹

          • 產(chǎn)品信息

             

            產(chǎn)品名稱(chēng)

            產(chǎn)品編號(hào)

            規(guī)格

            價(jià)格(元)

            MitoTracker®Deep Red FM 線粒體深紅色熒光探針

            40743ES50

            50 µg

            425.00

             

            產(chǎn)品描述

             

            MitoTracker® Deep Red FM是一種細(xì)胞滲透型的carbocyanine-based的深紅外紅色熒光探針(Ex=644 nm,Em=665 nm),包含標(biāo)記線粒體的弱巰基反應(yīng)性的氯甲基官能團(tuán),只需簡(jiǎn)單孵育細(xì)胞,即可被動(dòng)運(yùn)輸穿過(guò)細(xì)胞膜并直接聚集在活性線粒體上。一旦線粒體被染色后,還能根據(jù)后續(xù)實(shí)驗(yàn)的需求進(jìn)行固定(醛類(lèi)固定劑如甲醛)和透化(醛類(lèi)去污劑如Triton X-100),探針依然維持在細(xì)胞內(nèi)。本品適合雙標(biāo)實(shí)驗(yàn),因其紅色熒光與其他的綠色熒光探針具有良好的分辨率。

            雖然傳統(tǒng)的線粒體熒光探針如TMR和羅丹明123,也能很容易的聚集在功能線粒體上,但是一旦線粒體膜電位喪失即會(huì)被洗掉,從而在一些需要細(xì)胞進(jìn)行醛類(lèi)固定或者包含線粒體能量狀態(tài)影響因子的實(shí)驗(yàn)中,使其應(yīng)用大受限制。

             

            產(chǎn)品性質(zhì)

             

            CAS號(hào)(CAS NO.)

            N/A

            分子式(Formula)

            C34H36Cl2N2

            分子量(Molecular weight)

            543.58

            外觀(Appearance)

            Blue solid

            激發(fā)波長(zhǎng)(Ex)

            644 nm

            發(fā)射波長(zhǎng)(Em)

            665 nm

            結(jié)構(gòu)式(Structure)

            image.png 

             

            運(yùn)輸和保存方法

             

            室溫運(yùn)輸;-20℃避光干燥保存,有效期1年。

             

            使用方法

             

            1. 儲(chǔ)存液的配制

            本品是以粉末形式提供,使用前需將本品回溫至室溫。

            之后使用細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)別的無(wú)水DMSO(如Yeasen,貨號(hào):60313ES60)將其充分溶解至終濃度1 mM。

            本品M. Wt.= 543.58 g/mol,換算下來(lái),50 µg粉末只需加入92 µL DMSO即可得到1 mM儲(chǔ)存液。

            可根據(jù)單次的使用量將儲(chǔ)存液分裝后放到-20℃避光,避免反復(fù)凍融。

            2. 工作液的配


            根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖褂貌煌奶结槤舛龋韵碌钠鹗疾僮鳁l件僅作參考,可根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型和其他的相關(guān)因素如細(xì)胞或組織的透化等進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。

            用適當(dāng)?shù)木彌_液或者細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋1 mM儲(chǔ)存液至工作液濃度。一般推薦使用濃度為25-500 nM。對(duì)于后續(xù)需要做固定或透化的樣本,推薦工作濃度為100-500 nM,為了降低過(guò)度加載導(dǎo)致的潛在偽影和線粒體毒性,在不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的前提下應(yīng)盡可能低濃度染色。另外,濃度過(guò)高也可能對(duì)其他細(xì)胞結(jié)構(gòu)進(jìn)行染色。

            3. 染色及檢測(cè)

            1)貼壁細(xì)胞的染色

            培養(yǎng)皿/板內(nèi)加入適量的培養(yǎng)基覆蓋蓋玻片進(jìn)行爬片培養(yǎng)。當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)至所需豐度,吸除培養(yǎng)液,加入37℃預(yù)熱的MitoTracker® Deep Red FM染色工作液。在所使用細(xì)胞正常培養(yǎng)條件下孵育15-45 min(最佳孵育時(shí)間需優(yōu)化)。染色結(jié)束后,使用新鮮培養(yǎng)液或緩沖液替換上述染色液,即可將其置于熒光顯微鏡下觀察或熒光酶標(biāo)儀下讀數(shù)。或者進(jìn)行后續(xù)的固定和透化步驟,見(jiàn)步驟4。

            2)懸浮細(xì)胞的染色

            離心收集細(xì)胞,吸除上清,利用37℃預(yù)熱的MitoTracker® Deep Red FM染色工作液輕輕重懸細(xì)胞。在所使用細(xì)胞正常培養(yǎng)條件下孵育15-45 min(最佳孵育時(shí)間需優(yōu)化)。染色結(jié)束后,離心收集細(xì)胞,利用37℃預(yù)熱的新鮮培養(yǎng)液或緩沖液重懸細(xì)胞,被染色的細(xì)胞可用流式細(xì)胞儀、熒光酶標(biāo)儀、熒光顯微鏡進(jìn)行分析。

            如果需要蓋玻片上固定化的細(xì)胞,那么可在鋪片前先用多聚賴(lài)氨酸(poly-D-lysine)包被載玻片或蓋玻片。

            或者進(jìn)行后續(xù)的固定和透化步驟,見(jiàn)步驟4。

            4. 固定和透化

            1)染色結(jié)束后,利用培養(yǎng)液或緩沖液清洗細(xì)胞;

            2)小心吸走清洗液。換用新鮮配制且預(yù)熱的含2-4%甲醛的緩沖液或培養(yǎng)液進(jìn)行細(xì)胞固定。

            3清洗細(xì)胞:吸除固定液,用適當(dāng)緩沖液沖洗細(xì)胞數(shù)次。

            4)細(xì)胞透化(可選):

            ICC等實(shí)驗(yàn)需要細(xì)胞要做透化,則可將已固定的細(xì)胞直接加入含有去污劑如Triton X-100的緩沖液中孵育。透化結(jié)束后,用緩沖液清洗細(xì)胞即可進(jìn)行后續(xù)ICC實(shí)驗(yàn)。經(jīng)檢測(cè),利用含0.2% Triton X-100的PBS孵育內(nèi)皮細(xì)胞10 min可以達(dá)到良好的透化效果。

            另外,還可利用預(yù)冷的丙酮透化5 min,之后用PBS清洗細(xì)胞。經(jīng)驗(yàn)證,即使后繼沒(méi)有進(jìn)一步的抗體標(biāo)記,丙酮透化處理也可降低背景信號(hào)。

             

            注意事項(xiàng)

             

            1DMSO有毒,使用時(shí)請(qǐng)小心操作。

            2)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

            3)本產(chǎn)品僅作科研用途!

             

            HB211230





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