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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級(jí)會(huì)員·12年
36416ES08蛋白L純化預(yù)裝柱，5 mL
| 參考價(jià): | ￥ 3528 |
| 訂貨量: | 1臺(tái) |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 36416ES08 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù)：593更新時(shí)間：2022-11-21 15:01:13
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5mL |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | 36416ES08 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 儲(chǔ)存 | 價(jià)格（元） |
Protein L 4FF Chromatography Column, 5 mL 蛋白L純化預(yù)裝柱，5 mL | 36416ES08 | 5 mL | 4℃ | 3528.00 |
36416ES25 | 5 mL×5 | 4℃ | 14088.00 |
蛋白L純化預(yù)裝柱，5 mL描述
天然蛋白L（Protein L）是從馬格努斯消化鏈球菌分離出來(lái)的能和免疫球蛋白特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)，分子量為36 KD。本產(chǎn)品使用的是基因改造后的蛋白L ，既保留了與抗體k鏈結(jié)合的特性，同時(shí)也不會(huì)影響抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)。與 protein A 和 Protein G 相比，Protein L 更能廣泛地結(jié)合各種來(lái)源及亞類的抗體，包括人、小鼠、大鼠、兔和雞，但不結(jié)合牛、山羊或綿羊來(lái)源的免疫球蛋白。
Protein L Agarose Resin 4FF是用于分離和純化單克隆抗體的通用性親和層析介質(zhì)，產(chǎn)品以高度交聯(lián)的瓊脂糖凝膠為基質(zhì)，重組Protein L為配基，具有很高的物理化學(xué)穩(wěn)定性，可以在相對(duì)較高的流速下進(jìn)行抗體的純化，適用于工業(yè)客戶。利用本產(chǎn)品經(jīng)過(guò)一步親和層析，可從腹水、血清和培養(yǎng)液等樣品中得到高純度的抗體，使用方便，應(yīng)用廣泛。
本品Protein L 4FF Chromatography Column，1mL是一種裝填了Protein L Agarose Resin 4FF的中壓預(yù)裝柱，規(guī)格5mL，預(yù)裝柱具有標(biāo)準(zhǔn)接口，可以適配商品化的各類中壓色譜系統(tǒng)，如?KTA 等，方便客戶操作。
產(chǎn)品性質(zhì)
基質(zhì)（Matrix） | 高度交聯(lián)的4%瓊脂糖微球 |
配體（Ligand） | 重組蛋白L |
孔徑（Bead size） | 45-165 µm |
最大流速（Flowmax） | 0.3 MPa,3 bar |
儲(chǔ)存緩沖液（Buffer） | 含20%乙醇的1×PBS |
載量（Capacity） | ＞30 mg human IgG/mL基質(zhì) |
pH范圍（pH range） | 3-10 |
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸。4℃保存，2年有效。
需準(zhǔn)備試劑
【注】：建議以下緩沖液在使用前用0.22 μm或0.45 μm濾膜過(guò)濾。
結(jié)合/洗雜緩沖液：0.15 M NaCl, 20 mM Na2HPO4, pH 7.0
洗脫緩沖液：0.1 M甘an酸，pH 3.0
中和液：1 M Tris-HCl，pH 8.5
使用方法
【注】上柱之前要確保樣品溶液有合適的離子強(qiáng)度和pH值，可以用結(jié)合/洗雜緩沖液對(duì)血清樣品、腹水或細(xì)胞培養(yǎng)液稀釋，或者樣品用結(jié)合/洗雜緩沖液透析。
1樣品純化（以Akta系統(tǒng)為例）
1）準(zhǔn)備：將泵管道中注滿去離子水。去掉上塞子，將層析柱連接至色譜系統(tǒng)中。再折斷下口，將預(yù)裝柱接到色譜系統(tǒng)中，并旋緊。
2）清洗：3-5倍柱體積去離子水沖洗層析柱中儲(chǔ)存液。
3）平衡：用5倍柱體積的結(jié)合Buffer平衡層析柱，使填料處于與目的蛋白相同的緩沖體系下，起到保護(hù)蛋白的作用。
4）上樣：將樣品加到平衡好的層析柱中，推薦流速1-5 ml/min，保證目的蛋白與樹脂充分接觸，提高目的蛋白的回收率，收集流出液，待檢測(cè)。【注】樣品的粘度增加使得即使上樣體積很少，也會(huì)導(dǎo)致層析柱很大的反壓。上樣量不要超過(guò)柱子的結(jié)合能力。大量的樣品體積也可能造成很大的反壓，使得進(jìn)樣器更難使用。
5）洗雜：用10-15倍柱體積的洗雜Buffer進(jìn)行清洗，直到紫外吸收達(dá)到一個(gè)穩(wěn)定的基線，去除非特異性吸附的雜蛋白，收集洗雜液，待檢測(cè)。
6）洗脫：用洗脫Buffer 采用一步法或線性梯度洗脫。一步洗脫中，通常5倍柱體積洗脫液足夠?qū)⒛康牡鞍紫疵撓聛?lái)。也可以用一個(gè)小的梯度，例如20倍柱體積或更多，來(lái)分離不同結(jié)合強(qiáng)度的蛋白質(zhì)。
7）清洗及保存：依次使用3倍柱體積的結(jié)合Buffer和5倍柱體積的去離子水平衡填料，最后再用5倍柱體積的20%的乙醇平衡，然后保存在等體積的20%的乙醇中，置于4℃保存，防止填料被細(xì)菌污染。
2 SDS-PAGE檢測(cè)
將純化過(guò)程中得到的樣品（包括原始樣品、流出組分、洗雜及洗脫組分等）利用SDS-PAGE進(jìn)行檢測(cè)，判定其純化效果。
3 樹脂清洗
隨著一些變性物質(zhì)的沉淀和蛋白的聚集，往往造成流速和結(jié)合載量下降，影響柱子的性能，這時(shí)需對(duì)柱子進(jìn)行清洗：
1）去除沉淀或變性物質(zhì)
① 用2倍柱體積的6 M鹽酸胍溶液進(jìn)行清洗；
② 用5倍柱體積的PBS，pH 7.4 清洗。
2）去除由于疏水性吸附造成的非特異吸附物質(zhì)
① 用3-4倍柱體積的70%乙醇或2倍柱體積的1% Triton™ X-100清洗；
② 用5倍柱體積的PBS, pH 7.4 清洗。
注意事項(xiàng)
1）請(qǐng)勿冷凍保存本產(chǎn)品。
2）所有操作過(guò)程中，樣本需要在4℃或冰上操作。
3）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
4）本產(chǎn)品僅作科研用途！
附錄1 常見問(wèn)題與解答
問(wèn)題 | 可能原因 | 推薦解決方法 |
柱子反壓過(guò)高 | 填料被堵塞 | 清洗填料 |
裂解液中含有微笑的固體顆粒，建議上柱前使用0.22 µm/0.45 µm濾膜過(guò)濾。 | ||
樣品純化過(guò)程中曲線不穩(wěn) | 樣品或 buffer 中有氣泡 | 趕出氣泡 |
樣品和buffer進(jìn)行脫氣 | ||
洗脫組分中沒有目的蛋白 | 樣品中抗體濃度太低 | 使用其抗原做配體的介質(zhì) |
抗體被降解 | 適當(dāng)?shù)奶岣呦疵損H | |
樣品與Protein L結(jié)合力低 | 換用Protein A或Protein A/G樹脂純化 | |
回收率逐漸減低 | 上樣量太多 | 減少上樣量 |
柱子太臟，載量降低 | 清洗樹脂 |
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格（mL） | 價(jià)格（元） |
Protein G Agarose Resin 蛋白G瓊脂糖純化樹脂 | 36401ES08/25/60 | 5/25/100 | 546/2186/7426 |
Protein A Agarose Resin 4FF 蛋白A瓊脂糖快速純化樹脂 | 36402ES08/25/60 | 5/25/100 | 866/2656/8856 |
Protein A/G Agarose Resin 蛋白A/G瓊脂糖純化樹脂 | 36403ES03/05/08/25/60 | 1/2/5/25/100 | 278/538/878/2886/7426 |
Protein A/G Agarose Resin 4FF 蛋白A/G瓊脂糖快速純化樹脂 | 36404ES08/25/60 | 5/25/100 | 978/3186/8726 |
Protein G Agarose Resin 蛋白G瓊脂糖純化樹脂 | 36405ES08/25/60 | 546/2186/7426 | |
Protein G Agarose Resin 4FF 蛋白G瓊脂糖快速純化樹脂 | 36406ES08/25/60 | 5/25/100 | 978/3186/8726 |
Protein A 4FF Chromatography Column, 1mL 蛋白A純化預(yù)裝柱，1mL | 36409ES03/08 | 1/5×1 | 528/2218 |
Protein A 4FF Chromatography Column, 5mL 蛋白A純化預(yù)裝柱，5mL | 36410ES08/25 | 5/5×5 | 1848/6838 |
Protein G 4FF Chromatography Column, 1mL 蛋白G純化預(yù)裝柱，1mL | 36413ES03/08 | 1/5×1 | 528/2218 |
Protein G 4FF Chromatography Column, 5mL 蛋白G純化預(yù)裝柱，5mL | 36414ES03/08 | 5/5×5 | 1848/6838 |
Protein A/G MagBeads(IP Grade) 蛋白A/G免疫沉淀磁珠 | 36417ES03/08 | 1/5 | 787/2937 |
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