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Spherisorb色譜柱的清洗、再生和存放

A. 清洗與再生

  如果發(fā)生峰形改變、峰分叉、出現(xiàn)肩峰、保留時間改變、分離度變化或柱壓升高，說明色譜柱可能已被污染。更換當前使用的保護柱通常可以恢復色譜柱的性能。如果色譜柱性能未恢復(或者您沒有使用保護柱)，請遵循下文詳述的程序操作。為防止?jié)撛诘奈廴居绊憴z測器性能，建議清洗期間斷開所有檢測器與色譜柱洗脫液的連接。對任何清洗程序來說，反轉(zhuǎn)通過色譜柱的液流方向(反沖)都可能提升清洗效率。

1、反相色譜柱

  通常情況下，用純有機溶劑進行沖洗(小心避免緩沖液出現(xiàn)沉淀)就足以去除大部分污染物。如果沖洗不能解決問題，可采用以下清洗和再生步驟沖洗色譜柱。請根據(jù)樣品和/或您認為污染色譜柱的物質(zhì)的性質(zhì)，選擇與之匹配的常規(guī)清洗方法(見表4)。用20倍柱體積(例如對于4.6 x 250 mm色譜柱，使用80 mL溶劑)HPLC級溶劑沖洗色譜柱。將流動相溫度升至35-55℃可以提高清洗效率。如果清洗和再生之后色譜柱性能仍然很差，請致電當?shù)氐奈痔厥擂k事處獲得更多支持。

2、正相色譜柱

  要再生色譜柱，請泵送20-30倍柱體積的二氯甲烷和異丙醇通過色譜柱。也可以基于疑似污染物選用其他清洗溶劑，例如四氫呋喃(THF)。

  保護柱需要根據(jù)樣品污染情況定期更換。當系統(tǒng)背壓穩(wěn)步上升至設定壓力限值時，通常表明需要更換保護柱。突然出現(xiàn)分叉峰也表明需要更換保護柱。

B.存放

  將色譜柱完全密封，防止柱床因溶劑蒸發(fā)而變干。

1．反相色譜柱

  如果色譜柱需要在室溫下存放超過四天，應使用100%乙腈在室溫下保存色譜柱(氰基的色譜柱除外)。對于高溫應用，請在使用后立即使用100%乙腈保存色譜柱，以便盡可能延長色譜柱使用壽命。

  切勿使用緩沖鹽洗脫液保存色譜柱。如果流動相中含有緩沖鹽，存放前先用10倍柱體積(常規(guī)色譜柱體積請參閱表2)的HPLC級水/有機溶劑沖洗色譜柱，然后用100%乙腈替換柱內(nèi)的水。如果不執(zhí)行這個中間步驟，在引入100%乙腈時，色譜柱內(nèi)可能會出現(xiàn)緩沖鹽沉淀。

  注：上述儲存建議的例外是用于反相方法的氰基色譜柱，這些色譜柱不應儲存在100%中等極性溶劑中(乙腈、甲醇、異丙醇)。將CN-RP色譜柱儲存在0.1M乙酸銨/乙腈中 50/50。

2.正相色譜柱

  為了能在啟動時快速平衡色譜柱，請使用常用流動相保存正相色譜柱。完全密封色譜柱避免柱床蒸發(fā)和干燥。